本文關鍵詞：顱骨鉆孔法在SSST大鼠模型的應用及評價

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【摘要】：目的 觀察顱骨鉆孔法在SSST大鼠模型中的應用，通過了解CNS中的腦紅蛋白、Caspase-3的表達情況，與其他兩種方法比較進行評價，從而探討一種成功穩(wěn)定、易于復制、對大鼠腦損傷程度輕的SSST大鼠模型。為后續(xù)的研究開發(fā)提供實驗模型。 方法 采用SD大鼠63只根據(jù)完全隨機原則每組21只分為：開顱后于上矢狀竇中后1/3內注入Activated Cephaloplastin Reagent（A組），開顱后結扎上矢狀竇中后1/3及回流靜脈加注入Activated Cephaloplastin Reagent（B組），顱骨鉆孔于上矢狀竇中后1/3內注入Activated Cephaloplastin Reagent（C組），其中A組分為A1（8h）、A2（24h）、A3（72h）三個亞組，B組分為B1（8h）、B2（24h）、B3（72h）三個亞組，C組分為C1（8h）、C2（24h）、C3（72h）三個亞組,造模成功后，分別于8h、24h、72h對大鼠進行神經功能評分、處死、固定、取材；尼氏染色、HE染色觀察其細胞形態(tài)；免疫組化檢測腦紅蛋白和caspase-3的表達。 結果 1．三組模型神經功能缺損程度評分結果：三組模型在三個時間點的差異，經單因素方差分析，結果都有統(tǒng)計學意義（P=0.001，F(xiàn)=10.520）、（P=0.000，F(xiàn)=12.229）、（P=0.001，F(xiàn)=11.641），說明三組模型的神經功能缺損程度隨著時間呈遞增趨勢。A、B、C三組模型之間的神經功能缺損程度的評分的差異，結果在8小時、24小時、72小時均有統(tǒng)計學意義，三組之間經兩兩比較，其中B組與A組之間具有差異（P0.05），B組與C組有差異（P0.05），但A組與C組比較無差異（P0.05），以B組的缺損程度最大； 2.腦組織水含量測定：三組模型在三個時間點的差異，經單因素方差分析，結果都有統(tǒng)計學意義（P=0.003，F(xiàn)=8.425）、（P=0.000，F(xiàn)=16.740）、（P=0.002，F(xiàn)=9.129），說明三組模型的竇旁腦組織水含量于術后8小時組竇旁腦組織水含量增加，24小時組竇旁腦組織水含量進一步升高,72小時組竇旁腦組織水含量達到高峰全腦出現(xiàn)水腫。A、B、C三組模型之間的竇旁腦組織水含量的差異，結果在8小時、24小時、72小時均有統(tǒng)計學意義，三組之間經兩兩比較，其中B組與A組之間具有差異（P0.05），B組與C組有差異（P0.05），但A組與C組比較無差異（P0.05），以B組的腦組織水含量最顯著； 3.腦組織切片HE染色顯示：三組模型HE染色顯示8小時、24小時組腦組織水腫明顯,神經元變性,表現(xiàn)為核固縮,部分細胞致密、深染,突起消失,血管間隙增寬,可見血管擴張。72小時組可見神經元稀少，細胞間距增大,大片神經細胞變性壞死，可見紅細胞滲出多； 4.腦組織切片尼氏染色顯示：三組模型尼氏染色表現(xiàn)為深藍色顆�；虬邏K狀(形如虎斑)的尼氏體數(shù)量由8小時組至72小時組逐漸減少,細胞核為藍色,染色背景為淡藍色； 5.Caspase-3免疫組化染色：三組模型在三個時間點的差異，，經單因素方差分析，結果都有統(tǒng)計學意義（P=0.000，F(xiàn)=164.671）、（P=0.000，F(xiàn)=34.760）、（P=0.000，F(xiàn)=71.523），說明三組模型腦組織Caspase-3的表達于術后8小時組Caspase-3陽性細胞數(shù)增加；24小時組Caspase-3陽性細胞數(shù)達峰值；72小時組Caspase-3陽性細胞數(shù)緩慢下降，較24小時組減少但較8小時組增加。A、B、C三組模型之間腦組織Caspase-3表達的差異，結果在8小時、24小時、72小時均有統(tǒng)計學意義，三組之間經兩兩比較，其中B組與A組之間具有差異（P0.05），B組與C組有差異（P0.05），但A組與C組比較無差異（P0.05），以B組腦組織Caspase-3陽性細胞數(shù)最多。 6.腦紅蛋白免疫組化染色：三組模型在三個時間點的差異，經單因素方差分析，結果都有統(tǒng)計學意義（P=0.003，F(xiàn)=8.418）、（P=0.000，F(xiàn)=13.689）、（P=0.000，F(xiàn)=22.033），說明三組模型腦組織腦紅蛋白的表達隨著缺血時間的延長，NGB蛋白免疫反應陽性細胞數(shù)呈逐漸減少。A、B、C三組模型之間腦組織腦紅蛋白表達的差異，結果在8小時、24小時、72小時均有統(tǒng)計學意義，三組之間經兩兩比較，其中B組與A組之間具有差異（P0.05），B組與C組有差異（P0.05），但A組與C組比較無差異（P0.05）。 結論 1.顱骨鉆孔法制作SSST大鼠模型是一種可行的方法； 2.顱骨鉆孔法制作SSST大鼠模型可為探討腦靜脈竇血栓形成的發(fā)病機理及病理生理演變提供易于復制的實驗模型。
【關鍵詞】：上矢狀竇血栓形成 動物模型 Caspase-3 腦紅蛋白
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R-332;R743.3
【目錄】：

• 主要英文縮略語索引4-5
• 摘要5-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-19
• 結果19-34
• 討論34-39
• 結論39-40
• 參考文獻40-44
• 綜述44-49
• 參考文獻48-49
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文49-50
• 致謝50

【參考文獻】

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1 尹靜;張祥建;李俐濤;楊q

本文編號：843167