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體外傳代對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-12 11:03

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【摘要】:目的:觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)體外長(zhǎng)期傳代擴(kuò)增后形態(tài)表型、增殖及分化特性的變化。方法:分別以雙酶消化及組織塊法分離培養(yǎng)h UCMSCs;細(xì)胞傳至18代(P18),觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)曲線(xiàn)、克隆形成、細(xì)胞周期、干細(xì)胞表型、多向分化能力的變化,全面評(píng)測(cè)連續(xù)傳代對(duì)h UCMSCs生物學(xué)特性的影響。結(jié)果:雙酶消化結(jié)合組織塊法可高效分離獲得大量h UCMSCs,細(xì)胞穩(wěn)定傳代并保持間充質(zhì)干細(xì)胞特性;早期細(xì)胞多呈長(zhǎng)梭形或紡錘形,至P18時(shí)呈多角不定型且細(xì)胞體積變大,胞漿增加明顯。傳代至P18后,h UCMSCs的群體倍增時(shí)間增加至60 h以上,絕大多數(shù)細(xì)胞處于G0/G1期,且成纖維細(xì)胞集落形成單位(colony-forming unit-fibroblast,CFU-F)形成降低,克隆集落減小。h UCMSCs可表達(dá)且不因持續(xù)傳代丟失間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記,但僅早期傳代細(xì)胞表達(dá)多能干細(xì)胞標(biāo)記Oct-4及SSEA-4。特異性染色及相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè)提示P18 h UCMSCs的成脂肪、成軟骨及成骨誘導(dǎo)分化能力較早期傳代細(xì)胞減弱。結(jié)論:h UCMSCs是具備高增殖活性和多向分化特性的間充質(zhì)干細(xì)胞群,體外長(zhǎng)期傳代擴(kuò)增的h UCMSCs呈現(xiàn)一定的復(fù)制性衰老趨勢(shì),但不會(huì)丟失干性,可穩(wěn)定表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞特異性表面標(biāo)記并保持分化活性。
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院正畸科;第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院組織工程研究中心軍事口腔醫(yī)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 體外傳代 增殖 分化
【基金】:陜西省“13115”科技創(chuàng)新工程重大科技專(zhuān)項(xiàng)計(jì)劃(2008ZDKG-65) 軍事口腔醫(yī)學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題(2014KB06)
【分類(lèi)號(hào)】:R329
【正文快照】: 基于干細(xì)胞的組織工程和再生醫(yī)學(xué)可能成為修復(fù)損傷和疾病組織的革命性醫(yī)療手段[1],而間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在人體中分布廣泛,其中人胎兒臍帶來(lái)源的MSCs(human um-bilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCM-SCs)被認(rèn)為是具備更高可塑性和更低免

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):836824

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