本文關(guān)鍵詞：體外傳代對人臍帶間充質(zhì)干細胞生物學(xué)特性的影響

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【摘要】：目的:觀察人臍帶間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)體外長期傳代擴增后形態(tài)表型、增殖及分化特性的變化。方法:分別以雙酶消化及組織塊法分離培養(yǎng)h UCMSCs;細胞傳至18代(P18),觀察細胞形態(tài)、生長曲線、克隆形成、細胞周期、干細胞表型、多向分化能力的變化,全面評測連續(xù)傳代對h UCMSCs生物學(xué)特性的影響。結(jié)果:雙酶消化結(jié)合組織塊法可高效分離獲得大量h UCMSCs,細胞穩(wěn)定傳代并保持間充質(zhì)干細胞特性;早期細胞多呈長梭形或紡錘形,至P18時呈多角不定型且細胞體積變大,胞漿增加明顯。傳代至P18后,h UCMSCs的群體倍增時間增加至60 h以上,絕大多數(shù)細胞處于G0/G1期,且成纖維細胞集落形成單位(colony-forming unit-fibroblast,CFU-F)形成降低,克隆集落減小。h UCMSCs可表達且不因持續(xù)傳代丟失間充質(zhì)干細胞標(biāo)記,但僅早期傳代細胞表達多能干細胞標(biāo)記Oct-4及SSEA-4。特異性染色及相關(guān)基因表達檢測提示P18 h UCMSCs的成脂肪、成軟骨及成骨誘導(dǎo)分化能力較早期傳代細胞減弱。結(jié)論:h UCMSCs是具備高增殖活性和多向分化特性的間充質(zhì)干細胞群,體外長期傳代擴增的h UCMSCs呈現(xiàn)一定的復(fù)制性衰老趨勢,但不會丟失干性,可穩(wěn)定表達間充質(zhì)干細胞特異性表面標(biāo)記并保持分化活性。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院正畸科;第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院組織工程研究中心軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 人臍帶間充質(zhì)干細胞 體外傳代 增殖 分化
【基金】：陜西省“13115”科技創(chuàng)新工程重大科技專項計劃(2008ZDKG-65) 軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室開放課題(2014KB06)
【分類號】：R329
【正文快照】： 基于干細胞的組織工程和再生醫(yī)學(xué)可能成為修復(fù)損傷和疾病組織的革命性醫(yī)療手段[1],而間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在人體中分布廣泛,其中人胎兒臍帶來源的MSCs(human um-bilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCM-SCs)被認為是具備更高可塑性和更低免

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本文編號：836824