本文關(guān)鍵詞：剛地弓形蟲Peroxiredoxin多克隆抗體的制備及鑒定

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【摘要】：目的原核表達(dá)剛地弓形蟲過氧化物氧化還原酶(peroxiredoxin,Prx)并制備多克隆抗體。方法 PCR技術(shù)擴(kuò)增弓形蟲cDNA中的prx基因,克隆至pET-28a(+)載體,構(gòu)建prx/pET-28a(+)重組表達(dá)載體,轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌(E.coli)Rosetta中誘導(dǎo)表達(dá)。親和層析純化重組Prx蛋白,并制備兔多克隆抗體,蛋白印跡技術(shù)對(duì)多克隆抗體進(jìn)行鑒定。結(jié)果成功從弓形蟲cDNA中擴(kuò)增出prx目的基因,構(gòu)建了prx/pET-28a(+)重組質(zhì)粒,獲得抗Prx重組蛋白的多克隆抗體。蛋白印跡技術(shù)檢測(cè)出弓形蟲Prx的特異性條帶。結(jié)論重組弓形蟲Prx制備的多克隆抗體能檢測(cè)Prx在弓形蟲速殖子表達(dá)。
【作者單位】： 江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院;中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】： 剛地弓形蟲 過氧化物氧化還原酶 原核表達(dá) 多克隆抗體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81301453) 衛(wèi)生部寄生蟲病原與媒介生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(No.WSBKTKT201302) 中國(guó)博士后科學(xué)基金特別資助(No.2015T80518);中國(guó)博士后科學(xué)基金(No.2014M561598) 江蘇省博士后科研計(jì)劃(No.1402171C) 江蘇大學(xué)高級(jí)人才啟動(dòng)基金(No.13JDG023,No.13JDG127)聯(lián)合資助~~
【分類號(hào)】：R382.5
【正文快照】： (1.School of Medicine,Jiangsu University,Zhenjiang212013,China;2.National Institute of Parasitic Diseases,Chinese Center for Disease Control and Prevention,Shanghai 200025,China)剛地弓形蟲是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生的寄生蟲。免疫功能正常的人感染弓形蟲后,一般表

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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1 張金陽(yáng);孫濤;楊光文;宋玉竹;韓芹芹;夏雪山;;猴B病毒gG蛋白的主要特性與B細(xì)胞表位預(yù)測(cè)[J];昆明理工大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年02期

2 吳鍇;胡建敏;殷國(guó)榮;曹蕾;葛玉芳;劉美娜;孟曉麗;;重組弓形蟲Peroxiredoxin蛋白誘導(dǎo)小鼠的免疫應(yīng)答及其抗弓形蟲感染的保護(hù)作用[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2010年01期

3 李雪秋;劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);殷國(guó)榮;李佩珍;孟曉麗;劉紅麗;;小鼠血清中弓形蟲Peroxiredoxin抗原間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2010年03期

4 郝海霞;王海龍;殷麗天;孟曉麗;申金雁;殷國(guó)榮;;剛地弓形蟲過氧化物氧化還原酶基因重組真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及表達(dá)[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2012年07期

5 王海龍;劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);殷國(guó)榮;孟曉麗;曹蕾;劉美娜;;rTgPrx蛋白滴鼻免疫小鼠抗弓形蟲感染作用[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2010年03期

6 胡建敏;吳鍇;殷國(guó)榮;孟曉麗;唐華;郝海霞;張曙霞;;重組弓形蟲peroxiredoxin蛋白聯(lián)合佐劑皮下免疫小鼠抗弓形蟲攻擊的保護(hù)作用[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2010年05期

7 王芬;殷國(guó)榮;孟曉麗;劉紅麗;殷麗天;王海龍;;剛地弓形蟲Peroxiredoxin基因編碼蛋白結(jié)構(gòu)與抗原表位的生物信息學(xué)分析[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2010年07期

8 吳鍇;王海龍;殷國(guó)榮;孟曉麗;劉紅麗;;重組弓形蟲Peroxiredoxin蛋白聯(lián)合佐劑皮下免疫小鼠誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答動(dòng)態(tài)變化[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2010年10期

9 劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);王海龍;孟曉麗;劉紅麗;申金雁;殷國(guó)榮;原飛;;重組剛地弓形蟲Peroxiredoxin蛋白的純化及抗血清制備[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2011年03期

10 黃金貴;李運(yùn)娜;宮鵬濤;楊舉;李赫;李淑紅;張國(guó)才;張西臣;李建華;;弓形蟲親環(huán)蛋白亞單位疫苗的免疫保護(hù)性研究[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2011年07期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 高劍;剛地弓形蟲誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸癌ct26細(xì)胞周期阻滯及相關(guān)的抗癌作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉轉(zhuǎn)轉(zhuǎn);剛地弓形蟲peroxiredoxin基因的克隆、表達(dá)、純化及免疫保護(hù)性研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

2 李冬娜;剛地弓形蟲RH株速殖子在鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)觀察[D];蘇州大學(xué);2010年

3 李雪秋;小鼠血清中弓形蟲Peroxiredoxin抗原間接ELISA檢測(cè)方法的建立及其血清流行病學(xué)應(yīng)用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

4 葛璞;剛地弓形蟲培養(yǎng)上清對(duì)卵巢癌細(xì)胞SKOV-3的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

5 孔t，

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