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瞬時感受器電位通道vanilloid 4在機械牽張人腦微血管內皮細胞中對內皮型一氧化氮合酶的作用

發(fā)布時間:2017-09-09 18:18

  本文關鍵詞:瞬時感受器電位通道vanilloid 4在機械牽張人腦微血管內皮細胞中對內皮型一氧化氮合酶的作用


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【摘要】:目的:篩選人腦微血管內皮細胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)中瞬時感受器電位(transient receptor potential,TRP)通道亞型,檢測該通道亞型在機械牽張刺激中對內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)蛋白表達的影響及探討相關機制。方法:熒光定量RT-PCR(q RT-PCR)、Western印跡及細胞免疫熒光篩選HBMEC上TRP通道亞型。根據(jù)篩選的TRP通道亞型將細胞分組,應用多功能小型生物撞擊機給予機械牽張刺激;流式細胞儀檢測細胞牽張前后胞內Ca2+熒光強度變化;Western印跡檢測e NOS蛋白表達情況。結果:q RT-PCR結果表明:TRPV4及TRPC1的m RNA相對表達量較多;細胞免疫熒光及Western印跡顯示TRPV4通道蛋白表達;流式細胞儀檢測結果顯示,特異性TRPV4通道抑制組較單純牽張組Ca2+相對濃度低(P0.001),較未牽張組(P=0.072)、非特異性TRP通道抑制組(P=0.308)無明顯差異。Western印跡檢測結果顯示:TRPV4通道抑制組和內皮型一氧化氮合酶抑制組e NOS蛋白表達水平較單純牽張組明顯降低(P0.05),較未牽張組無明顯差異(P0.05)。結論:TRPV4在HBMEC上有表達,機械牽張將其激活后,可以引起e NOS蛋白表達增多,其機制可能與胞外Ca2+的內流有關。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關鍵詞】TRPV 機械牽張刺激 內皮型一氧化氮合酶
【基金】:國家臨床重點?平ㄔO項目(財社[2011]170號) 重慶市科委自然科學基金(cstc2013jcyj A10079)~~
【分類號】:R363
【正文快照】: 第一作者(First author):蒲九君,Email:346909502@qq.com一氧化氮(nitric oxide,NO)影響下丘腦抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)分泌是鞍區(qū)術后水鹽代謝紊亂常見的原因之一[1-2]。而前期對人腦微血管內皮細胞(human brain microvascularendothelial cel l s,H BMEC)的研

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本文編號:822010

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