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IGF-1通過(guò)BTEB調(diào)控CYPs途徑保護(hù)心肌細(xì)胞免于凋亡

發(fā)布時(shí)間:2017-09-09 15:37

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【摘要】:目的探討胰島素樣生長(zhǎng)因子1對(duì)大鼠心肌細(xì)胞凋亡保護(hù)作用的基因調(diào)控機(jī)制。方法體外培養(yǎng)新生大鼠心肌細(xì)胞,通過(guò)RT-PCR及Werstern-blot觀察IGF-1調(diào)節(jié)BTEB及其下游細(xì)胞色素C家族成員CYP1A1、2E1、3A11和11A1的基因表達(dá)情況。過(guò)氧化氫處理誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡,通過(guò)Annexin VFITC/PI雙染色法、Caspase 3活性測(cè)定、Hoechest33258染色法和Tunel法觀察下調(diào)CYPs的基因表達(dá)對(duì)心肌細(xì)胞凋亡的影響;JC-1線粒體膜電位檢測(cè)法和透射電鏡觀察心肌細(xì)胞線粒體膜電位和形態(tài)的改變。結(jié)果大鼠心肌細(xì)胞經(jīng)IGF-1刺激60 min后,BTEB m RNA和蛋白表達(dá)均明顯下降;IGF-1刺激48 h后,CYP1A1、2E1、3A11和11A1的m RNA和蛋白表達(dá)均明顯下降(均P0.01);用BTEB特異性的si RNA人為下調(diào)BTEB基因表達(dá)后,CYP1A1、3A1 m RNA和蛋白表達(dá)明顯下降(均P0.01),CYP2E1、11A1 m RNA和蛋白表達(dá)變化不明顯。與對(duì)照組相比,H2O2誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞用CYP1A1、2E1、3A11和11A1特異性的si RNA人為下調(diào)上述基因表達(dá)后,Annexin V-FITC/PI雙染法顯示心肌細(xì)胞凋亡率下降(均P0.05)、Caspase 3活性測(cè)定顯示酶活性降低(均P0.05)、Hoechest33258染色和Tunel法檢測(cè)結(jié)果顯示凋亡小體和凋亡細(xì)胞數(shù)目減少,與IGF-1的抗心肌細(xì)胞凋亡效果相似;且細(xì)胞線粒體膜電位下降率明顯降低(均P0.05),線粒體形態(tài)明顯改善。結(jié)論 IGF-1可以通過(guò)下調(diào)細(xì)胞色素C家族成員CYP1A1、2E1、3A11和11A1的表達(dá)改善線粒體功能,其中CYP1A1、3A11受BTEB調(diào)控途徑發(fā)揮抗心肌細(xì)胞凋亡作用。
【作者單位】: 廣東醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室;廣東醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院;廣東醫(yī)學(xué)院廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東醫(yī)學(xué)院第二臨床學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】心肌細(xì)胞 凋亡 基本轉(zhuǎn)錄元件結(jié)合蛋白(BTEB) 細(xì)胞色素C 胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-)
【基金】:廣東省自然科學(xué)基金(No.S2013010011763) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(No.2011B031600007,No.2013B021800066)
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: IGF-1對(duì)心肌細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用[1,2],但具體的基因調(diào)控機(jī)制目前尚不清楚[3]。課題組前期工作采用基因芯片技術(shù)篩選出基本轉(zhuǎn)錄元件結(jié)合蛋白(BTEB)[4],屬于轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子SP1超家族,其在啟動(dòng)子區(qū)的結(jié)合位點(diǎn)與SP1相似,目前研究發(fā)現(xiàn)其主要調(diào)控細(xì)胞色素C(CYP)家族成員的表達(dá)[5~7],

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

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2 梅文靜;吳柱國(guó);李濤;;胰島素生長(zhǎng)因子-1保護(hù)心肌細(xì)胞免于凋亡的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年02期

3 Chunyan ZHANG;Qian XU;Chunling ZHAO;Chunlai ZHANG;;Effect of Ginsenoside Rbl on Expressive Proteome of Rat Neurons[J];Agricultural Biotechnology;2012年02期

4 許曉玲;李晉菊;吳柱國(guó);;IGF-Ⅰ在線粒體介導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡中的作用(文獻(xiàn)綜述)[J];放射免疫學(xué)雜志;2013年03期

5 趙春玲;張春來(lái);徐倩;楊燁;張春燕;;人參皂甙Rb1對(duì)馬桑內(nèi)酯癲癇的作用及海馬蛋白組表達(dá)的影響[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年05期

6 張劍凱;崔曉軍;許曉玲;丁碧藍(lán);李晉菊;李濤;吳柱國(guó);;胰島素樣生長(zhǎng)因子-1通過(guò)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2通路下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子基本轉(zhuǎn)錄元件結(jié)合蛋白表達(dá)抗心肌細(xì)胞凋亡[J];解剖學(xué)報(bào);2015年03期

7 王全暉;郭樹軍;張春旭;張?jiān)?郭寧輝;;IGF-Ⅱ、IGF-lR、IGFBP-3在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及診斷價(jià)值研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年24期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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2 孫中嬋;NDRG2在心肌缺血再灌注損傷中Akt所介導(dǎo)的胰島素保護(hù)效應(yīng)中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 王霄霖;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞SCA-1+CD45+CD31+亞群向心肌樣細(xì)胞分化機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2014年

4 張步升;MiR-92a調(diào)控Smad7抗心肌缺血再灌注損傷的機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 張姍姍;活性氧相關(guān)分子對(duì)唑類藥物藥效的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

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3 龔?fù)?丹參酚酸/三七皂苷配伍抗心肌缺氧損傷的作用機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2013年

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5 田常生;pEGFP-N1/Igf1質(zhì)粒對(duì)大鼠牙囊細(xì)胞增殖及分化影響的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

6 吳志敏;NT pro BNP在蒽環(huán)類藥物治療AL患者致心臟毒性的臨床研究[D];河南科技大學(xué);2013年

7 沈月騰;pEGFP-N1/Igf1和pEGFP-N1/Bmp2質(zhì)粒對(duì)大鼠牙囊細(xì)胞增殖影響的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

8 付巖;苦參堿調(diào)控Akt/mTOR/p70S6K信號(hào)通路抑制異丙腎上腺素致大鼠心肌肥厚的分子機(jī)制研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

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1 劉穎;王雷;彭珍;王潔;王振全;李春梅;宮海濱;;犬心肌細(xì)胞分離方法的改良[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年08期

2 柏樹令,何維為,李吉;甲亢心臟病心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變——游離心肌細(xì)胞的形態(tài)測(cè)量(同體積對(duì)比)[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1988年05期

3 程淮勇;;發(fā)現(xiàn)一種致心肌肥厚因子[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1988年01期

4 程薇,盧興,楊繼聲;培養(yǎng)心肌細(xì)胞“缺血性”損傷模型的研究進(jìn)展[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1990年02期

5 柏樹令;何維為;李吉;;生長(zhǎng)發(fā)育中心肌細(xì)胞橫切面的掃描電鏡觀察[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);1992年S1期

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9 汪長(zhǎng)華;心肌細(xì)胞的培養(yǎng)及注意事項(xiàng)[J];中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志;2003年03期

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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào):821285

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