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肺炎克雷伯菌嗜鐵素基因攜帶情況與其感染A549細胞時NGAL的表達研究

發(fā)布時間:2017-09-09 13:11

  本文關鍵詞:肺炎克雷伯菌嗜鐵素基因攜帶情況與其感染A549細胞時NGAL的表達研究


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【摘要】:第一部分肺炎克雷伯菌嗜鐵素基因攜帶情況分析 目的:研究重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院臨床分離的肺炎克雷伯菌株攜帶嗜鐵素基因的情況。 方法:隨機選取從我院臨床住院患者中分離的肺炎克雷伯菌株34株(血液13株,痰液21株),采用PCR法檢測菌株嗜鐵素基因的攜帶情況。 結果:34株菌株中,所有菌株均攜帶腸菌素(Ent)基因entB,9株(26.5%)攜帶耶爾森菌素(Ybt)基因fyuA,3株(8.8%)攜帶沙門菌素——糖基化腸菌素(Gly-Ent)基因iroN,1株(2.9%)攜帶產氣菌素(Aer)基因iutA;所有菌株中,只含有Ent一種嗜鐵素基因的25株(73.5%),,同時含有其他非Ent嗜鐵素基因的9株(26.5%),其中entB、fyuA均陽性者6株(17.6%),entB、ybtS及iroN均陽性者2株(5.9%),4種基因均陽性者1株(2.9%)。 結論:我院臨床分離的肺炎克雷伯菌攜帶的嗜鐵素基因以Ent基因為主,非Ent嗜鐵素基因的檢出需引起注意。 第二部分肺炎克雷伯菌感染A549細胞時活性氧的產生上調NGAL的表達 目的:研究肺炎克雷伯菌(KP)感染A549細胞時,活性氧(ROS)的產生對A549細胞天然免疫蛋白——中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)表達的影響。 方法:將A549細胞株分5組進行實驗:正常對照組,H_2O_2組,H_2O_2+維生素E(VE)組,KP組,KP+VE組。采用魯米諾化學發(fā)光法檢測各組活性氧水平;實時熒光定量PCR(RT-qPCR)法檢測A549細胞NGAL mRNA的表達;Western-blot檢測A549細胞NGAL蛋白的表達。 結果:KP組與陽性對照H_2O_2組ROS水平均較正常對照組升高,同時,兩組A549細胞NGAL mRNA及蛋白質的表達也較對照組升高,而兩組在加入抗氧化劑VE后,ROS水平都降低,相應的,兩組A549細胞NGAL mRNA及蛋白質的表達也下降。 結論:肺炎克雷伯菌感染呼吸道A549細胞時,ROS的產生上調A549細胞天然免疫蛋白NGAL的表達。
【關鍵詞】:肺炎克雷伯菌 嗜鐵素 基因型 活性氧 NGAL A549細胞 肺炎克雷伯菌
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R378.996
【目錄】:
  • 英漢縮略語名詞對照5-6
  • 摘要6-8
  • ABSTRACT8-12
  • 第一部分 肺炎克雷伯菌嗜鐵素基因攜帶情況分析12-24
  • 前言12-13
  • 1 材料和方法13-15
  • 2 結果15-20
  • 3 討論20-22
  • 參考文獻22-24
  • 第二部分 肺炎克雷伯菌感染 A549 細胞時活性氧的產生上調 NGAL 的表達24-34
  • 前言24
  • 1 材料與方法24-28
  • 2 結果28-30
  • 3 討論30-32
  • 參考文獻32-34
  • 結論34-35
  • 文獻綜述35-44
  • 參考文獻41-44
  • 致謝44-45
  • 攻讀學位期間的研究成果及發(fā)表的學術論文目錄45-46

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 王偉,肖明;微生物嗜鐵素介導的鐵攝取[J];生物學雜志;2005年04期

2 王爽;朱道銀;帖儒修;李娜;王瑜偉;;鼠抑鐵素2蛋白的原核表達及鑒定[J];中國生物制品學雜志;2008年08期



本文編號:820624

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