人臍帶間充質干細胞的新分離方法及其作為骨組織工程種子細胞的相關研究
本文關鍵詞:人臍帶間充質干細胞的新分離方法及其作為骨組織工程種子細胞的相關研究
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【摘要】:目的探討人臍帶間充質干細胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)的新分離方法及其作為骨組織工程(tissue engineering bone,TEB)種子細胞的特點。方法處理臍帶組織,將含有雜質較多的組織去除,使剩余組織盡可能為Wharton’s jelly。采用組織塊培養(yǎng)皿(實驗組)及普通培養(yǎng)皿(對照組)分別分離臍帶間充質干細胞,統(tǒng)計組織塊培養(yǎng)成功率及獲取原代臍帶間充質干細胞的數(shù)量。流式細胞儀檢測3代細胞的表面分子,并進行成骨、成軟骨、成脂誘導以鑒定其多向分化潛能。將獲取的3代臍帶間充質干細胞與DBM骨體外構建組織工程骨,并檢測細胞與組織工程骨的黏附率,激光共聚焦及總蛋白檢測來確定細胞在支架材料上的生長情況。結果實驗組與對照組培養(yǎng)12 d時組織塊漂浮數(shù)為0 vs 13;培養(yǎng)成功率為(86.0±2.7)%vs(44±4)%,細胞數(shù)量為(24.7±3.6)×104vs(5.1±1.0)×104,2組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。P3細胞陽性表達CD44+、CD73+、CD90+、CD105+,陰性表達CD34+、CD45+,具有向成骨、脂肪、軟骨分化潛能。細胞在DBM上的黏附率為(81.3±4.7)%,相容性好,構建TEB上的種子細胞隨時間增殖。結論新分離方法可以簡化、規(guī)范操作過程,提高組織塊的利用率,獲取大量細胞(提高15~20倍)。細胞與DBM相容性好,可成功構建TEB。
【作者單位】: 濟南軍區(qū)總醫(yī)院骨病科;第三軍醫(yī)大學西南醫(yī)院骨科;
【關鍵詞】: 臍帶 臍帶間充質干細胞 組織塊分離法 骨組織工程
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 大學西南醫(yī)院骨科2)種子細胞的成骨活性在一定程度上決定骨修復能力。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs),具有多向分化潛能[1],是目前骨組織工程(tissue engi-neering bone,TEB)理想種子細胞。MSCs來源多種多樣[2],較為常見的是骨髓、臍帶、脂肪。但存在以下問題:隨
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,本文編號:798685
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