本文關(guān)鍵詞：安徽省臨床分離真菌的耐藥性分析及耐唑類(lèi)藥物白念珠菌ERG11基因的突變研究

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【摘要】：目的 了解安徽地區(qū)2008~2012年臨床分離的464株真菌感染的種類(lèi)和耐藥性特點(diǎn)，為臨床合理使用抗真菌藥物提供依據(jù)。 研究安徽省臨床分離的對(duì)唑類(lèi)藥物（氟康唑伊曲康唑伏立康唑）耐藥白念珠菌的ERG11基因突變情況，初步探討其與耐藥形成的關(guān)系。 材料與方法 菌株來(lái)源 464株真菌臨床分離株（已排除同一患者相同部位重復(fù)分離出的菌株）來(lái)自安徽省細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)中心2008年~2012年9月份收集的監(jiān)測(cè)網(wǎng)所屬40家醫(yī)院（由皖南、皖中、皖北不同級(jí)別的醫(yī)院組成）住院和門(mén)診患者的各類(lèi)臨床標(biāo)本。質(zhì)控菌株為近平滑念珠菌ATCC22019，由安徽省細(xì)菌耐藥監(jiān)控中心保存。 方法 1.采用沙保弱培養(yǎng)基對(duì)收集的464株真菌進(jìn)行培養(yǎng)分離，科瑪嘉顯色培養(yǎng)基進(jìn)行鑒定，采用微量稀釋法測(cè)定其對(duì)唑類(lèi)抗真菌藥物的敏感性。 2.將鑒定為對(duì)唑類(lèi)藥物耐藥的白念珠菌菌株及3株隨意挑選的敏感菌株接種于SDA培養(yǎng)基進(jìn)行分離、培養(yǎng)，提取篩選出耐藥的菌株及3株敏感株的基因組DNA。 3.設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增其ERG11基因，擴(kuò)增后送之測(cè)序，測(cè)序結(jié)果與GenBank中的已知標(biāo)準(zhǔn)序列（X13296）進(jìn)行比對(duì)分析，檢測(cè)是否出現(xiàn)基因突變位點(diǎn)。 結(jié)果 1.464株臨床分離真菌菌株中，以白色念珠菌為主，占69.0%，其次是光滑念珠菌，占16.8%；分離的真菌對(duì)兩性霉素B和5-氟胞嘧啶的敏感率較高，，而對(duì)伊曲康唑和氟康唑的敏感率相對(duì)較低。 2.耐藥的菌株及3株敏感株ERG11基因的PCR產(chǎn)物電泳后均成功獲得預(yù)期大小的片段（1641bp）。 3.測(cè)序結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)序列X13296比對(duì)分析后，發(fā)現(xiàn)34個(gè)不同的堿基突變位點(diǎn)，其中錯(cuò)義突變位點(diǎn)為14個(gè)。 結(jié)論 1.安徽地區(qū)臨床分離的真菌對(duì)唑類(lèi)抗真菌藥物已出現(xiàn)了不同程度的耐藥性，應(yīng)加強(qiáng)真菌耐藥性的監(jiān)測(cè)，另外臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗真菌藥物，以提高臨床治愈率。 2.研究發(fā)現(xiàn)耐唑類(lèi)藥物的白念珠菌ERG11基因存在多個(gè)錯(cuò)義突變位點(diǎn)，且多為多位點(diǎn)突變，可能與其耐藥性的產(chǎn)生有關(guān)，其中T123I、Y334S、G346A、V452D和L480F目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
【關(guān)鍵詞】：白念珠菌 唑類(lèi) ERG11 耐藥性
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R379;R446.5
【目錄】：

• 縮 略 詞 表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-16
• 結(jié)果16-22
• 討論22-25
• 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-30
• 附錄30-32
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷30
• 碩士期間研究工作30
• 發(fā)表論文30
• 碩士期間所獲榮譽(yù)及參加學(xué)術(shù)交流30-32
• 致謝32-33
• 綜述33-40
• 參考文獻(xiàn)37-40

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：795267