本文關鍵詞：華支睪吸蟲排泄-分泌產(chǎn)物對小鼠巨噬細胞一氧化氮產(chǎn)生和核轉錄因子κB活化的影響

  更多相關文章： 華支睪吸蟲 排泄-分泌產(chǎn)物 病原相關分子模式 一氧化氮 核轉錄因子κB

【摘要】：目的研究華支睪吸蟲(Clonorchis sinensis)排泄-分泌產(chǎn)物(ESPs)對小鼠巨噬細胞系RAW264.7一氧化氮(NO)產(chǎn)生與核轉錄因子κB(NF-κB)活化的影響。方法用20μg/ml華支睪吸蟲ESPs水溶性濃縮物及其有機溶劑提取物(ESPs-ex)和0.1μg/ml明尼蘇達沙門氏桿菌脂多糖(LPS-SM)分別刺激RAW264.7細胞,未刺激對照組加入等量Hank’s平衡鹽緩沖液(HBSS)。實驗同時用0.3 mmol/L誘導型一氧化氮合成酶(i NOS)抑制劑SMT作為干預。細胞培養(yǎng)18 h后,用Griess法檢測各組細胞培養(yǎng)上清液NO2-濃度。將p Ni Fty2-SEAP質粒轉染至4組刺激后RAW264.7細胞,培養(yǎng)18 h后,檢測培養(yǎng)上清液中可溶性胚胎堿性磷酸酶(SEAP)的吸光度(A620值),倒置顯微鏡觀察細胞內SEAP催化顯色情況。結果經(jīng)ESPs-ex和LPS-SM刺激后,細胞培養(yǎng)上清液中NO2-濃度分別為(14.30±1.62)和(14.10±2.17)μmol/L,均較未刺激對照組[(7.70±0.95)μmol/L]顯著增加(P0.05);加入SMT后,兩組NO2-濃度顯著下降,分別為(8.97±0.81)和(4.96±1.36)μmol/L(均P0.05)。經(jīng)ESPs刺激后,上清液中NO2-濃度為(4.06±0.62)μmol/L,較未刺激對照組顯著降低(P0.05);加入SMT后,NO2-濃度為(3.99±0.87)μmol/L,無明顯變化(P0.05)。ESPs刺激后,上清液SEAP的A620值為0.836±0.005,顯著高于未刺激對照組(0.097±0.009)(P0.05);鏡下可見細胞內出現(xiàn)廣泛、強烈的藍色顯色反應。ESPs-ex和LPS刺激后,上清液SEAP的A620值分別為0.112±0.004和0.116±0.009,略高于未刺激對照組(P0.05);鏡下見部分細胞內出現(xiàn)藍色顯色反應。結論華支睪吸蟲ESPs能夠促進RAW264.7細胞活化NF-κB,其水溶性濃縮物可抑制NO產(chǎn)生,ESPs-ex和LPS-SM可促進NO產(chǎn)生。
【作者單位】： 中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所
【關鍵詞】： 華支睪吸蟲 排泄-分泌產(chǎn)物 病原相關分子模式 一氧化氮 核轉錄因子κB
【基金】：國家自然科學基金(No.31260221)~~
【分類號】：R383.22
【正文快照】： 楊慶利1,2,蔣智華2,申繼清3,陳穎丹1,周曉農(nóng)1*culture supernatants were quantified by using HEK-BlueTMdetection medium and expressed as the value of optical densityat 620 nm(A620value).The intercellular activities of SEAP were determined by microscopic obser

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本文編號：791555