鼠傷寒沙門菌SL1344株侵襲性蛋白B缺失株的構(gòu)建及生物學(xué)特性
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【摘要】:目的:為了研制更加安全的鼠傷寒沙門菌弱毒株,本研究構(gòu)建了鼠傷寒沙門菌SL1344Δsip B基因缺失突變株。方法:首先構(gòu)建含缺失585 bp sipB基因的重組自殺性質(zhì)粒PREΔsipB,利用重組自殺性質(zhì)粒介導(dǎo)的等位基因交換技術(shù),兩步法篩選出SL1344的sip B缺失株。結(jié)果:PCR及測序結(jié)果表明SL1344ΔsipB構(gòu)建成功。進(jìn)一步生物學(xué)特性研究表明,缺失株SL1344ΔsipB保留了親本菌株SL1344的血清型1,4,5,12:i:1,2,且能夠穩(wěn)定遺傳缺失585 bp的sipB基因,生長速度沒有發(fā)生明顯改變;但是,與親本株SL1344相比,其毒力發(fā)生明顯改變,缺失株SL1344ΔsipB口服感染6周齡BALB/c小鼠的LD50為1.70×108CFU,毒力較親本株SL1344降低至1.4%,免疫保護(hù)效力實(shí)驗(yàn)顯示,對6周齡BALB/c小鼠免疫后第17天,鼠傷寒沙門菌野生株攻毒有50%的保護(hù)率。在給小鼠免疫后第14天血清抗體IgG達(dá)到最高。結(jié)論:結(jié)果表明,SL1344ΔsipB基因缺失株構(gòu)建成功,遺傳穩(wěn)定,毒力明顯降低,且具有較好的免疫原性,為研究鼠傷寒沙門菌sipB基因與其致病力之間的關(guān)系提供了方法,并為研制安全有效的沙門菌疫苗弱毒株奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 河南省動物疫病與公共安全院士工作站/河南科技大學(xué)動物疫病與公共衛(wèi)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 鼠傷寒沙門菌SL sipB基因 缺失株 生物學(xué)特性
【基金】:河南省科技攻關(guān)(112102110019) 河南科技大學(xué)博士啟動基金項(xiàng)目(09001580) 河南科技大學(xué)青年科學(xué)基金項(xiàng)目(13000820)資助
【分類號】:R378.22
【正文快照】: 鼠傷寒沙門菌(Salmonella typhimurium,ST)屬于腸道致病菌,也是重要的人類食物源性病原體,對于公共衛(wèi)生方面,該菌具有重要的意義[1]。沙門菌的致病機(jī)制與Ⅲ型分泌系統(tǒng)(T3SS)有關(guān),由SPI-1和SPI-2兩個(gè)毒力島編碼,負(fù)責(zé)細(xì)菌效應(yīng)蛋白的分泌和轉(zhuǎn)運(yùn),通過改變宿主細(xì)胞的生理機(jī)能來促進(jìn)
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,本文編號:791304
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