抗人血紅蛋白單克隆抗體的制備及鑒定
本文關(guān)鍵詞:抗人血紅蛋白單克隆抗體的制備及鑒定
【摘要】:目的運用雜交瘤技術(shù)制備抗血紅蛋白(hemoglobin,Hb)單克隆抗體,為進(jìn)一步探討Hb在帕金森病中的發(fā)病機制及早期診斷中的意義奠定基礎(chǔ)。方法用重組人Hb作為抗原免疫Balb/c小鼠,并將其脾細(xì)胞與同系骨髓瘤細(xì)胞融合制備雜交瘤,經(jīng)3次有限稀釋法及酶聯(lián)免疫吸附試驗法篩選獲得抗人Hb單克隆抗體雜交瘤株5B1。腹腔注射于免疫抑制Balb/c小鼠產(chǎn)生腹水,并利用Dot blotting、酶聯(lián)免疫吸附實驗,免疫共沉淀、Western blotting法及免疫組織化學(xué)染色法進(jìn)一步測定抗體效價,獲得一特異性抗Hb單克隆抗體。結(jié)果成功制備出1株高親和力、特異性好的抗Hb單克隆抗體。結(jié)論制備的單克隆抗體對Hb具有特異性(包括人血、猴及小鼠),為進(jìn)一步研究Hb在帕金森病(Parkinson's disease,PD)中的作用提供了有力的特異性工具。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院神經(jīng)生物學(xué)研究室;帕金森病研究北京重點實驗室;桂林醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室;北京腦重大疾病研究院帕金森病研究所;
【關(guān)鍵詞】: 血紅蛋白 單克隆抗體 帕金森病
【基金】:國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(2011CB504101) 國家自然科學(xué)基金(81071014,81371200,81401042) 國家科技支撐計劃課題(2012BAI10B03) 北京市自然科學(xué)基金(7122035) 首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項課題(2011-4001-01)~~
【分類號】:R392
【正文快照】: 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是繼阿爾茨海默病之后的第二大神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。目前基于運動癥狀的診斷已是疾病晚期,此時PD患者中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元蛻變率已經(jīng)達(dá)到70%以上[1]。然而,以路易體病變?yōu)橹饕卣鞯腜D病理變化早在黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元病變之前就已出現(xiàn)于嗅
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