發(fā)布時間：2017-09-03 00:12

  本文關(guān)鍵詞：煙曲霉Af293 chsD基因缺失突變株的構(gòu)建

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【摘要】：目的構(gòu)建Af293 chs D缺失突變株,并對chs D的功能進行初步的研究。方法 PCR擴增chs D兩側(cè)部分序列并連接至p PK2質(zhì)粒的潮霉素表達(dá)盒兩端,從而構(gòu)建重組質(zhì)粒p PK2/chs D-(L+R)。酶切p PK2/chs D-(L+R)并膠回收含chs D左側(cè)、hph表達(dá)盒及chs D右側(cè)的片段,連接至p DHt/SK而構(gòu)建二元質(zhì)粒p DHt/chs D::hph。經(jīng)ATMT方法將p DHt/chs D::hph轉(zhuǎn)化至Af293,經(jīng)潮霉素抗性篩選從而獲得煙曲霉△chs D突變株,并測量Af293,△chs D突變株生長直徑及掃描電鏡下觀察分生孢子形態(tài)。結(jié)果經(jīng)PCR初步鑒定,篩選出的突變株中,其染色體中的chs D序列已被hph置換,初步形態(tài)研究表明,△chs D突變株的生長速度顯著低于Af293野生型,且分生孢子凹陷呈干癟狀。結(jié)論成功獲得Af293△chs D突變株。chs D基因功能初步研究表明,chs D可能與煙曲霉的生長相關(guān)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)附屬深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院皮膚科;蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院皮膚科;
【關(guān)鍵詞】： 煙曲霉 chsD 基因置換 突變株
【基金】：廣東省醫(yī)學(xué)科研基金項目(B2013362)
【分類號】：R379
【正文快照】： 煙曲霉(Aspergillus fumigatus)普遍存在于環(huán)境中,是引起過敏性支氣管肺曲霉病、曲霉球和侵襲性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)的空氣播散性條件致病真菌。目前,由于癌癥、器官移植、艾滋病等原因造成免疫功能抑制患者的逐漸增多,侵襲性曲霉病的發(fā)病率也逐年增加[1]。雖然

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：781704