本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞型朊蛋白在不同月齡小鼠視網(wǎng)膜中表達(dá)的實驗研究

  更多相關(guān)文章： 細(xì)胞型朊蛋白 視網(wǎng)膜 ICR小鼠 β-淀粉樣蛋白

【摘要】：目的： 通過觀察細(xì)胞型朊蛋白（cellular prion protein, PrP~c）在2周齡，9月齡，18月齡正常ICR小鼠視網(wǎng)膜中的基因表達(dá)情況和蛋白表達(dá)情況，分析小鼠視網(wǎng)膜中PrP~c的表達(dá)與月齡的關(guān)系。并觀察分析18月齡小鼠視網(wǎng)膜組織與大腦組織PrP~c的表達(dá)含量的差異。為后續(xù)開展PrP~c與阿爾茨海默病(AD)和視覺病變間的關(guān)系提供實驗依據(jù)。 方法： 選取2周齡，，9月齡，18月齡健康ICR小鼠，每月齡段20只，雌雄各半。充分暴露眼球于眼緣，離斷眼球后極部的視神經(jīng)，利用顯微器械輕柔迅速的取出視網(wǎng)膜，將視網(wǎng)膜放入EP管內(nèi)，于-80°凍存。分別使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)技術(shù)檢測各組視網(wǎng)膜組織中PrP~c基因的表達(dá)情況；蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot, WB)技術(shù)檢測各組小鼠視網(wǎng)膜組織中PrP~c蛋白的表達(dá)情況。上述兩種方法分別檢測β-actin表達(dá)作為內(nèi)參因子。分析小鼠視網(wǎng)膜中PrP~c的表達(dá)水平與月齡的關(guān)系及18月齡小鼠視網(wǎng)膜與大腦組織PrPc的表達(dá)含量的差異。 結(jié)果： 1、各月齡段小鼠樣本組織中內(nèi)參因子β-actin的表達(dá)較穩(wěn)定，不隨月齡變化而改變，證實本研究所用PCR及Western Blot技術(shù)穩(wěn)定可靠，無明顯操作誤差； 2、2周齡、9月齡、18月齡小鼠視網(wǎng)膜中PrP~c基因表達(dá)水平隨月齡增大而逐漸增強(qiáng)，各月齡段PrP~c表達(dá)水平比較均有顯著性差異（P0.01）；各月齡段小鼠視網(wǎng)膜中PrP~c蛋白表達(dá)水平亦隨月齡增大而增強(qiáng)，各組比較均有顯著性差異（P0.01）； 3、18月齡組小鼠腦組織中PrP~c表達(dá)水平高于同組視網(wǎng)膜的表達(dá)水平，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。 結(jié)論： 在正常小鼠視網(wǎng)膜中存在PrP~c蛋白基因的表達(dá)，且表達(dá)水平隨著小鼠月齡的增加而逐漸增強(qiáng)，但弱于腦組織中的PrP~c的表達(dá)強(qiáng)度。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞型朊蛋白 視網(wǎng)膜 ICR小鼠 β-淀粉樣蛋白
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R774.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 前言9-12
• 第2章 材料與方法12-19
• 2.1 實驗材料12-13
• 2.1.1 實驗動物12
• 2.1.2 主要試劑12-13
• 2.1.3 主要儀器與設(shè)備13
• 2.2 實驗方法13-19
• 2.2.1 小鼠組織標(biāo)本取材13-14
• 2.2.2 RT-PCR 檢測小鼠組織表本中 PRP_C 基因的表達(dá)14-16
• 2.2.3 WB 檢測小鼠組織標(biāo)本中 PRP_C 蛋白的表達(dá)16-18
• 2.2.4 內(nèi)參因子的設(shè)置18
• 2.2.5 統(tǒng)計學(xué)處理18-19
• 第3章 結(jié)果19-24
• 3.1 Β-ACTIN19-20
• 3.2 PRP_C（RT-PCR 結(jié)果）20-22
• 3.3 PRP_C（WB 結(jié)果）22-24
• 第4章 討論24-27
• 第5章 結(jié)論27-28
• 致謝28-29
• 參考文獻(xiàn)29-33
• 附圖33-37
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果37-38
• 綜述38-45
• 參考文獻(xiàn)42-45

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本文編號：759201