本文關(guān)鍵詞：人顆粒蛋白前體F片段結(jié)構(gòu)域單克隆抗體的制備與鑒定

  更多相關(guān)文章： 顆粒前體蛋白 Grn F 酵母表達(dá)載體 雜交瘤 單克隆抗體

【摘要】：目的制備抗人顆粒蛋白前體F片段(GrnF)的單克隆抗體(mAb),并初步鑒定其生物學(xué)特性。方法通過分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建含人GrnF編碼序列的酵母表達(dá)載體,表達(dá)并純化酵母來源的融合人血清白蛋白(HSA)的GrnF片段HSA-GrnF。用純化的HSA-GrnF免疫BALB/c小鼠,然后將免疫小鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp2/0進(jìn)行融合,用ELISA篩選陽性克隆,并采用有限稀釋法進(jìn)行亞克隆;采用免疫熒光染色及Westernblot法對所獲得的mAb的特異性進(jìn)行鑒定,并用抗體亞類測定試劑盒檢測所獲得單克隆抗體亞類。結(jié)果成功獲得2株可分泌特異性抗GrnF的雜交瘤細(xì)胞株(1G6及4E8),經(jīng)鑒定這2株抗體重鏈亞類均為IgG1亞類。結(jié)論成功制備了抗人GrnF片段結(jié)構(gòu)域的單克隆抗體。
【作者單位】： 陜西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院秦巴山區(qū)可持續(xù)發(fā)展協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 顆粒前體蛋白 Grn F 酵母表達(dá)載體 雜交瘤 單克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81272543,81301957,81471772) 陜西省自然科學(xué)基金重點項目(2014JZ005) 中央高�；痦椖�(GK201301010)
【分類號】：R392;Q813.2
【正文快照】： 顆粒蛋白前體(progranulin,PGRN)是一種分子量約為88 ku的分泌性糖蛋白,由顆粒蛋白(granulin,GRN)基因編碼。PGRN在多種人類腫瘤,如乳腺癌、卵巢癌、肝癌和胃癌中高表達(dá),并在腫瘤細(xì)胞生長、侵襲和腫瘤組織血管生成等方面發(fā)揮重要的作用。PGRN通過促進(jìn)細(xì)胞增殖、減少細(xì)胞凋亡以

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