本文關(guān)鍵詞：大鼠門靜脈高壓食管靜脈曲張模型中內(nèi)皮祖細(xì)胞的變化及意義

  更多相關(guān)文章： 門靜脈縮窄 門靜脈高壓 大鼠模型 內(nèi)皮祖細(xì)胞 CD133 VEGF 免疫組織化學(xué) ELISA

【摘要】：目的：制作大鼠肝前性門靜脈高壓癥食管靜脈曲張模型及內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離、鑒定和培養(yǎng)。 方法：雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、對(duì)照組和模型組。模型組大鼠顯微鏡下游離，結(jié)扎并離斷左腎上腺靜脈，完全游離全長(zhǎng)左腎靜脈并清除左腎周圍脂肪組織；游離門靜脈主干，將8-9號(hào)注射器針頭與門靜脈主干并行，結(jié)扎后抽出針頭形成門靜脈縮窄。對(duì)照組僅處理左腎上腺靜脈。假手術(shù)組僅開腹探查。2周、4周后剖殺大鼠并測(cè)門靜脈壓力。留取肝臟、食管胃底組織，液氮凍存，另一部分石蠟包埋并切片HE染色。抽取門靜脈血，F(xiàn)icoll分離單個(gè)核細(xì)胞，EGM-2培養(yǎng)液誘導(dǎo)培養(yǎng)EPC。CD133和VEGFR2免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定。計(jì)算并比較各實(shí)驗(yàn)組間EPC的數(shù)量。 結(jié)果：模型組大鼠門脈壓力顯著高于對(duì)照組和假手術(shù)組,肉眼下及鏡下可見(jiàn)食管胃底靜脈曲張明顯。原代培養(yǎng)后可見(jiàn)EPC形成克隆，培養(yǎng)2-3周后可見(jiàn)明顯具有典型EPC特征的細(xì)胞集落形成，培養(yǎng)的細(xì)胞表達(dá)EPC表面標(biāo)志物CD133和VEGF2-R。模型組EPC數(shù)量明顯高于對(duì)照組。 結(jié)論：采用門靜脈縮窄的方法，，有效建立了大鼠門靜脈高壓癥食管靜脈曲張模型。EGM-2培養(yǎng)液培養(yǎng)外周血單個(gè)核細(xì)胞可以獲得內(nèi)皮祖細(xì)胞。內(nèi)皮祖細(xì)胞的水平可能與門靜脈高壓血管病變有關(guān)。 目的：檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組大鼠食管組織中CD133與VFGF的表達(dá)，檢測(cè)大鼠不同階段血清中及食管組織勻漿液中VEGF的表達(dá)。 方法：將各組大鼠按不同時(shí)間點(diǎn)剖殺取材，取食管組織一部分制作石蠟切片，一部分加裂解液勻漿。門靜脈采血離心收集血清。石蠟切片的食管組織HE染色后，Nikon Digital ECLIPSE C1system共聚焦顯微鏡下拍照并用Image-Pro Plus6.0軟件分析，計(jì)算食管粘膜下靜脈的密度及面積百分比。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)食管組織中CD133與VEGF的表達(dá)，雙抗夾心法ELISA檢測(cè)大鼠血清及食管勻漿液中VEGF蛋白水平。 結(jié)果：(1)靜脈曲張模型組中食管粘膜下血管密度明顯高于對(duì)照組，EPC細(xì)胞克隆數(shù)量與食管粘膜下靜脈數(shù)量/食管粘膜下層面積百分比，以及食管粘膜下靜脈面積/食管粘膜下層面積百分比均有顯著直線相關(guān)性。(2)門靜脈高壓癥食管靜脈曲張模型組大鼠食管粘膜下血管可見(jiàn)CD133和KDR陽(yáng)性的內(nèi)皮細(xì)胞，假手術(shù)組大鼠未見(jiàn)CD133和KDR陽(yáng)性內(nèi)皮細(xì)胞。(3)組織VEGF水平在各組間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組術(shù)后第4周血清VEGF水平明顯上調(diào)。 結(jié)論：CD133和KDR陽(yáng)性的內(nèi)皮祖細(xì)胞可能參與了大鼠門靜脈高壓模型中曲張靜脈的形成。血清VEGF水平上調(diào)，可能促進(jìn)EPC參與部分食管曲張靜脈的形成。
【關(guān)鍵詞】：門靜脈縮窄 門靜脈高壓 大鼠模型 內(nèi)皮祖細(xì)胞 CD133 VEGF 免疫組織化學(xué) ELISA
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R-332;R575.2
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 第一部分 肝前性門靜脈高壓大鼠模型的建立10-20
• 前言10
• 材料和方法10-17
• 討論17-18
• 參考文獻(xiàn)18-20
• 第二部分 食管粘膜下組織 CD133 和 KDR 的表達(dá)及意義20-32
• 前言20
• 材料和方法20-29
• 討論29-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 綜述32-37
• 參考文獻(xiàn)37-43
• 致謝43

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 韓德五;馬學(xué)慧;趙元昌;;肝硬化動(dòng)物模型的研究[J];山西醫(yī)藥雜志;1979年04期

2 陳治,張莉,黃宗海;VEGF基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));2000年03期

3 趙春華,郭虹,曹德駿;早期內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育與相關(guān)干細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];中華血液學(xué)雜志;2001年12期

本文編號(hào)：736145