本文關(guān)鍵詞：體外培養(yǎng)狀態(tài)下心肌細(xì)胞有絲分裂的證據(jù)

  更多相關(guān)文章： 有絲分裂 心肌細(xì)胞 免疫熒光技術(shù) 體外培養(yǎng) 大鼠

【摘要】：目的探討體外培養(yǎng)狀態(tài)下心肌細(xì)胞有絲分裂、增殖的證據(jù)。方法分離新生大鼠心肌細(xì)胞,分別原代培養(yǎng)0h至12d;免疫熒光分別雙標(biāo)心肌肌鈣蛋白-T(c Tn T)、磷酸化組蛋白H3(H3P)和微管蛋白(tubulin),利用活細(xì)胞工作站和熒光顯微鏡觀察處于分裂期的心肌細(xì)胞。結(jié)果原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞生長狀態(tài)好、純度高,可觀察到分裂各期的心肌細(xì)胞及其微管蛋白的變化。處于分裂各期的心肌細(xì)胞不隆起變圓仍維持扁平狀。分裂前期細(xì)胞核形狀規(guī)則,染色質(zhì)凝集,H3P開始表達(dá);前中期核膜破裂,紡錘體形成;中期染色體排列在赤道面,紡錘體呈典型紡錘樣;后期染色單體分開并移向兩極;末期子核形成,平行微管聚結(jié)在兩子核之間;胞質(zhì)分裂期形成兩個(gè)子細(xì)胞,兩個(gè)細(xì)胞分開后,可見有少量微管呈絲狀連接。原代培養(yǎng)1~12d的心肌細(xì)胞在整個(gè)細(xì)胞分裂圖像中很少見到雙核心肌細(xì)胞。培養(yǎng)第3天開始發(fā)現(xiàn)分裂象的心肌細(xì)胞,占總心肌細(xì)胞數(shù)的2/127(1.57%)和1/92(1.09%),培養(yǎng)第7天,分裂細(xì)胞比率達(dá)3/69(4.35%)和5/163(3.07%),培養(yǎng)第12天有2/100(2%)和0/60(0)的心肌細(xì)胞處于分裂期。結(jié)論體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞存在一定數(shù)量的完全有絲分裂,是心肌增殖和心肌再生的細(xì)胞學(xué)證據(jù)。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省醫(yī)用組織再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 有絲分裂 心肌細(xì)胞 免疫熒光技術(shù) 體外培養(yǎng) 大鼠
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為,高度分化的哺乳動(dòng)物心肌細(xì)胞 不能再分裂增殖,這些細(xì)胞永久地退出細(xì)胞周期。近年來,對(duì)哺乳動(dòng)物及人類心臟的研究發(fā)現(xiàn),心肌細(xì)胞自身能夠進(jìn)行分裂、增殖[1~3]。這使傳統(tǒng)的觀點(diǎn)受到了挑戰(zhàn),因此,心肌細(xì)胞增殖再生的研究已成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn),人類心臟再生

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