本文關(guān)鍵詞：shRNA表達(dá)載體對HSV-2 ICP4基因的干擾效應(yīng)

  更多相關(guān)文章： RNA干擾 短發(fā)夾RNA 質(zhì)粒載體 Ⅱ型單純皰疹病毒 ICP基因

【摘要】：目的構(gòu)建針對Ⅱ型單純皰疹病毒(HSV-2) ICP4基因的短發(fā)夾RNA(shRNA)重組表達(dá)載體,探究該載體表達(dá)的shRNA對HSV-2的抑制作用。方法重組表達(dá)載體通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,并接種HSV-2,48h后,實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測mRNA轉(zhuǎn)錄情況,Western blot檢測ICP4蛋白的表達(dá)情況,終點(diǎn)滴定法測定病毒的滴度。結(jié)果與對照組相比,干擾組對mRNA抑制率為71%,使蛋白表達(dá)減少71.81%,并且病毒滴度也明顯降低(P0.05)。結(jié)論構(gòu)建的pGPU6/Neo-shRNA ICP4重組質(zhì)粒表達(dá)載體能在體外細(xì)胞水平上干擾HSV-2 ICP4的基因表達(dá),抑制HSV-2在細(xì)胞中復(fù)制。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū);
【關(guān)鍵詞】： RNA干擾 短發(fā)夾RNA 質(zhì)粒載體 Ⅱ型單純皰疹病毒 ICP基因
【基金】：貴州省優(yōu)秀科技教育人才首長專項(xiàng)資金項(xiàng)目(NO:2009122)
【分類號】：Q78
【正文快照】： 生殖器皰疹(Genital herpes,GH)是一種易復(fù)發(fā)、難治愈的性傳播疾病,Ⅱ型單純皰疹病毒(Her-pes simplex virus type 2,HSV-2)是GH的主要病原體。目前,對HSV-2感染,主要使用阿昔洛韋和無環(huán)鳥苷等廣譜抗病毒藥物,這種控制無特異性,且病毒抗藥性有逐漸增加的趨勢,治療效果并不理想

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