本文關(guān)鍵詞：2008-2012年我國B型流感病毒耐藥毒株的流行狀況及生物學(xué)特性研究

  更多相關(guān)文章： B型流感病毒 耐藥 生物適應(yīng)性 雪貂

【摘要】：研究背景： 2007年,季節(jié)性流感耐藥毒株的出現(xiàn)和廣泛傳播引起了全球的極大關(guān)注,開展流行株的耐藥性監(jiān)測顯得尤為必要。從目前的監(jiān)測情況看,A型流感病毒對烷胺類藥物已存在普遍耐藥,因此建議不再使用烷胺類抑制劑治療和預(yù)防流感。而目前的流感毒株大多依然對NA抑制劑敏感,故目前NA抑制劑是治療和預(yù)防A型、B型流感的有效藥物。然而,對NA抑制劑耐藥或敏感性降低的B型流感病毒,人們對其生物學(xué)特性的了解還很有限。 研究目的： 分析2008-2012年我國B型流感病毒對NA抑制劑的耐藥情況,探究我國B型流感病毒耐藥相關(guān)突變株的體內(nèi)外生長特性,以期揭示其感染性和傳播性等特點,并為B型流感病毒耐藥突變位點補(bǔ)償位點的篩選提供線索。 研究方法： 對我國2008-2012年分離自ILI (Influenza like illness)病例的682株B型流感病毒通過基因型分析法和表型分析法,挑選出耐藥相關(guān)突變株(MUT)及其野生型敏感對照株(WT),并對其進(jìn)行3次噬斑純化,進(jìn)一步在細(xì)胞(MDCK)水平和動物(雪貂)水平上對其進(jìn)行復(fù)制力、感染性和傳播性等生物學(xué)適應(yīng)性研究。 主要結(jié)果： 我國2008-2012年共發(fā)現(xiàn)6株B型流感耐藥相關(guān)突變株。與WT株(B/SichuanYucheng/1238/2010)相比,攜帶NA I221T耐藥突變和HA S208P伴隨突變的MUT株(B/Shanghai-Pudongxi/1125/2011)對oseltamivir的敏感性降低(ICs0值升高9倍)；在體外水平上,MUT株對底物的親和力和在MDCK細(xì)胞中的復(fù)制能力均略高于WT株,但二者無明顯差異；在體內(nèi)水平上,MUT株和WT株均可通過密切接觸而在雪貂間有效傳播,MUT株的傳播效率略低于WT株但二者無明顯差異。 結(jié)論： 2008-2012年我國B型流感病毒耐藥相關(guān)突變株出現(xiàn)的比例很低,MUT株和WT株在體內(nèi)外的生物學(xué)特性相似,這提示NA I221T突變可能并不影響毒株在體內(nèi)外的生物學(xué)特性,HA S208P伴隨突變或許起到一定的補(bǔ)償作用,但需進(jìn)一步通過反向遺傳的實驗方法驗證。同時,B型耐藥相關(guān)突變株的出現(xiàn)及其生物學(xué)適應(yīng)性與野生株的相似也提示在我國乃至全球加強(qiáng)B型流感病毒耐藥性持續(xù)監(jiān)測的重要性。
【關(guān)鍵詞】：B型流感病毒 耐藥 生物適應(yīng)性 雪貂
【學(xué)位授予單位】：中國疾病預(yù)防控制中心
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R373.13
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• Abstract9-11
• 前言11-16
• 第一部分 2008-2012年我國B型流感病毒耐藥相關(guān)突變株的篩選及其序列特征分析16-29
• 1 材料與方法16-20
• 1.1 序列來源16
• 1.2 耐藥相關(guān)突變株篩選16
• 1.3 CL法測IC_(50)16-19
• 1.4 序列分析和進(jìn)化樹分析19
• 1.5 突變位點在蛋白質(zhì)分子模型中的標(biāo)記19-20
• 2 結(jié)果20-27
• 2.1 我國2008-2012年B型流感耐藥相關(guān)突變株篩選20-21
• 2.2 NA耐藥相關(guān)突變位點與伴隨突變位點特征分析21-23
• 2.3 NA和HA基因序列進(jìn)化分析23-24
• 2.4 耐藥相關(guān)突變株的NA和HA蛋白晶體結(jié)構(gòu)特點24-27
• 3 討論27-28
• 4 小結(jié)28-29
• 第二部分 B型耐藥相關(guān)突變株的噬斑純化29-40
• 1 材料與方法29-36
• 1.1 病毒29
• 1.2 細(xì)胞29
• 1.3 試劑和耗材29-30
• 1.4 方法30-36
• 2 結(jié)果36-38
• 2.1 噬斑純化MUT病毒37
• 2.2 純化后MUT病毒和WT病毒的序列分析37-38
• 2.3 擴(kuò)大培養(yǎng)38
• 3 討論38-40
• 第三部分 B型耐藥相關(guān)突變株及其野生株體外生物學(xué)特性研究(細(xì)胞水平)40-47
• 1 方法40-43
• 2 結(jié)果43-45
• 2.1 生長曲線測定43-44
• 2.2 NA酶活測定44-45
• 3 討論45-47
• 第四部分 B型耐藥相關(guān)突變株體內(nèi)生物學(xué)特性研究(動物水平)47-61
• 1 材料與方法47-53
• 2 結(jié)果53-59
• 2.1 雪貂抗體水平53-56
• 2.2 雪貂體溫變化56-57
• 2.3 雪貂洗鼻液病毒載量57-59
• 3 小結(jié)59-60
• 4 討論60-61
• 第五部分 討論61-63
• 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-66
• 綜述66-81
• 流行性感冒病毒耐藥性監(jiān)測研究進(jìn)展66-73
• 參考文獻(xiàn)70-73
• 流行性感冒病毒耐藥性檢測方法研究進(jìn)展73-81
• 參考文獻(xiàn)78-81
• 致謝81-85
• 論文發(fā)表和會議報告情況85

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 楊子峰;秦笙;陳曉紅;莫自耀;王丹芬;關(guān)文達(dá);鐘南山;;甲型流感病毒空斑形成技術(shù)的改進(jìn)和應(yīng)用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年17期

2 賈雙榮;張可s，

本文編號：724951