本文關鍵詞：乳桿菌對Staphylococcus aureus和Streptococcus pyogenes抑菌作用的研究

  更多相關文章： 乳桿菌 細菌性皮膚感染 金黃色葡萄球菌 化膿性鏈球菌 抑菌 有機酸 H_2O_2

【摘要】：細菌是皮膚表面最常見的微生物,細菌性皮膚感染也是最常見的皮膚感染疾病,細菌性皮膚感染常見的致病菌是金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌。細菌性皮膚感染通常表現(xiàn)為斑(片)、丘疹、丘皰疹、水皰、囊腫等原發(fā)性損傷,也可表現(xiàn)為脫屑、糜爛、潰瘍等繼發(fā)性損傷。目前,治療細菌性皮膚感染主要采用抗生素藥物。一些常用的抗生素類藥物有復方新諾明、四環(huán)素、利福平、氟喹諾酮等。但是,抗生素類藥物的大量使用,容易使致病菌產(chǎn)生抗藥性,引發(fā)更為嚴重的感染,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌所引發(fā)的社區(qū)獲得性皮膚感染就是一個很好的例子。另外,大量使用抗生素類藥物可能會引發(fā)其他種類致病菌的變異,對人體健康造成嚴重的不利影響。因此,找到一種對人體危害小甚至零危害的治療方法,將會對皮膚感染的治療具有十分重要的意義。 本研究的目的是分析乳桿菌代謝產(chǎn)物對細菌性皮膚感染主要致病菌(金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌)的抑制作用,分析乳桿菌用于治療細菌性皮膚感染的可行性。首先,篩選對金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌抑菌效果強的乳桿菌,采用的是基于雙層平板打孔法的抑菌試驗。然后,檢測分析乳桿菌代謝產(chǎn)物中主要的抑菌物質(zhì)。包括以下四部分的試驗：經(jīng)過不同處理的乳桿菌發(fā)酵上清液的抑菌試驗；H+濃度對抑菌作用影響試驗；基于雙層平板打孔法、高效液相色譜法(HPLC)和比色法,乳桿菌培養(yǎng)過程中發(fā)酵上清液的抑菌活性、有機酸含量和H202含量的檢測試驗；乳酸、乙酸和H202對的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)測定試驗。最后,檢測分析抑菌效果強的四株乳桿菌用于商業(yè)化生產(chǎn)的可行性。包括以下三部分試驗：乳桿菌所在屬種的鑒定試驗；與用于治療細菌性皮膚感染的部分商品的對比試驗；乳桿菌的安全性評價試驗。 研究結(jié)果表明,乳桿菌在對金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的抑菌試驗中均有抑菌圈出現(xiàn),不同菌株所產(chǎn)生的抑菌圈直徑大小差別較大,乳桿菌發(fā)酵上清液對金黃色葡萄球菌的抑菌試驗產(chǎn)生的抑菌圈大于化膿性鏈球菌。 乳桿菌的發(fā)酵上清液經(jīng)不同處理后的抑菌試驗中,除H202后抑菌圈直徑都減小；除有機酸后檢測不到明顯的抑菌圈；除H202、除有機酸再濃縮10倍后可以檢測到直徑很小的明顯抑菌圈。無菌MRS(調(diào)pH分別為3.5、4.0、4.5)的抑菌試驗中,pH為4.0、4.5的MRS液體培養(yǎng)基沒有檢測到抑菌圈；而pH為3.5的MRS液體培養(yǎng)基在對化膿性鏈球菌的抑菌試驗中僅檢測到了較小的抑菌圈(8.46mm)。 乳桿菌培養(yǎng)過程中,抑菌活性大小KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0342-1KLDS1.0344 KLDS1.0203KLDS1.0210-1,乳酸含量大�。篕LDS1.0391KLDS1.0667KLDS1.0342-1 KLDS1.0344KLDS1.0203KLDS1.0210-1,乙酸含量大小KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0342-1KLDS1.0344KLDS1.0203KLDS1.0210-1, H2O2含量大�。篕LDS1.0203KLDS1.0667KLDS1.0391KLDS1.0344KLDS1.0210-1KLDS1.0342-1=對金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的MIC：H202乙酸乳酸,對金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌的MBC:H2O2乙酸乳酸。 KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0391為植物乳桿菌,KLDS1.0342-1為副干酪乳桿菌,與實驗室菌種庫的命名和編號一致�；罹苿╊愃幬镏蟹蛛x出來的乳桿菌F1培養(yǎng)過程中發(fā)酵上清液有機酸含量、H202含量和對指示菌的抑菌活性都較低。乳桿菌的安全性評價試驗中,KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0342-1、KLDS1.0391對鏈霉素均具有抗性,KLDS1.0344對氨芐青霉素和慶大霉素還具有一定的抗性,對四環(huán)素、紅霉素、氯霉素敏感,KLDS1.0667、 KLDS1.0342-1、KLDS1.0391對氨芐青霉素、四環(huán)素、紅霉素、氯霉素、慶大霉素敏感；化膿性鏈球菌ATCC19615菌落周圍出現(xiàn)透明的溶血圈,KLDS1.0344、KLDS1.0667、KLDS1.0342-1、 KLDS1.0391菌落周圍沒有溶血圈出現(xiàn)。 本研究中,對細菌性皮膚感染主要致病菌抑菌效果最強的乳桿菌為植物乳桿菌KLDS1.0344、 KLDS1.0667、 KLDS1.0391,副干酪乳桿菌KLDS1.0342-1。乳桿菌代謝產(chǎn)物中最主要的抑菌物質(zhì)是乳酸,乙酸和H2O2對乳桿菌的抑菌活性也有影響。對金黃色葡萄球菌和化膿性鏈球菌抑菌和殺菌作用的大�。篐2O2乙酸乳酸。植物乳桿菌KLDS1.0667、KLDS1.0391對細菌性皮膚感染常見致病菌的抑菌效果強,對常見的五種抗生素抗性小,沒有溶血性。
【關鍵詞】：乳桿菌 細菌性皮膚感染 金黃色葡萄球菌 化膿性鏈球菌 抑菌 有機酸 H_2O_2
【學位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R371;TQ920.1
【目錄】：

• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 1 前言13-25
• 1.1 立題背景13-14
• 1.2 文獻綜述14-23
• 1.2.1 細菌性皮膚感染及治療方法14-19
• 1.2.2 乳桿菌治療細菌性皮膚感染的理論依據(jù)19-21
• 1.2.3 乳桿菌治療細菌性皮膚感染的研究現(xiàn)狀21-23
• 1.3 本研究的目的和意義23-24
• 1.4 本研究采用的技術路線24-25
• 2 材料與方法25-36
• 2.1 試驗材料25-30
• 2.1.1 供試菌株25-27
• 2.1.2 培養(yǎng)基27-28
• 2.1.3 主要試劑28-29
• 2.1.4 主要溶液的配制29
• 2.1.5 主要儀器及設備29-30
• 2.2 試驗方法30-36
• 2.2.1 供試菌株的活化與培養(yǎng)30
• 2.2.2 對指示菌具有抑制作用乳桿菌的初步篩選30-31
• 2.2.3 乳桿菌代謝產(chǎn)物對指示菌的抑制作用31
• 2.2.4 H~+濃度對抑菌作用的影響31-32
• 2.2.5 乳桿菌在培養(yǎng)過程中抑菌活性、主要有機酸以及H_2O_2含量的測定32
• 2.2.6 乳酸、乙酸和H_2O_2最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的測定32-33
• 2.2.7 菌株鑒定33-34
• 2.2.8 用于治療細菌感染的部分商品對指示菌的抑制作用34
• 2.2.9 乳桿菌的安全性評價34-36
• 3 結(jié)果與分析36-57
• 3.1 對指示菌具有抑制作用的乳桿菌的初步篩選36-38
• 3.2 乳桿菌代謝產(chǎn)物對指示菌的抑制作用38-40
• 3.2.1 乳桿菌代謝產(chǎn)物經(jīng)不同處理后的抑菌作用38-40
• 3.2.2 上清液中H~+濃度對抑菌作用的影響40
• 3.3 乳桿菌在培養(yǎng)過程中抑菌活性、主要有機酸含量及H_2O_2含量40-47
• 3.3.1 乳桿菌在培養(yǎng)過程中發(fā)酵上清液的抑菌活性40-43
• 3.3.2 乳桿菌在培養(yǎng)過程中發(fā)酵上清液中有機酸含量的測定43-46
• 3.3.3 乳桿菌在培養(yǎng)過程中發(fā)酵上清液中H_2O_2含量的測定46-47
• 3.4 乳酸、乙酸和H_2O_2最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的測定47-49
• 3.4.1 MIC的測定結(jié)果47-48
• 3.4.2 MBC的測定結(jié)果48-49
• 3.5 菌株的鑒定49-51
• 3.6 用于治療細菌感染的部分商品對指示菌的抑制作用51-53
• 3.6.1 抗生素類藥物對指示菌的抑制作用51
• 3.6.2 活菌制劑類藥物對指示菌的抑制作用51-53
• 3.7 乳桿菌的安全性評價53-57
• 3.7.1 抗生素抗性試驗53-56
• 3.7.2 溶血性試驗56-57
• 4 討論57-63
• 4.1 乳桿菌代謝產(chǎn)物中主要抑菌物質(zhì)的探究57
• 4.2 乳桿菌培養(yǎng)過程中抑菌活性、主要有機酸含量及H_2O_2含量的測定57-59
• 4.2.1 抑菌活性的測定57-58
• 4.2.2 主要有機酸含量的測定58
• 4.2.3 H_2O_2含量的測定58-59
• 4.3 乳酸、乙酸和H_2O_2對指示菌MIC和MBC的測定59-60
• 4.4 菌株鑒定方法60
• 4.5 用于治療細菌性皮膚感染的部分商品對指示菌的抑制作用分析60-61
• 4.6 乳桿菌的安全性評價61-63
• 5 結(jié)論63-64
• 致謝64-65
• 參考文獻65-71
• 附錄71-75
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 崔艷偉;孟祥晨;;乳桿菌的分離及鑒定[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2008年06期

2 張魯冀;孟祥晨;;自然發(fā)酵東北酸菜中乳桿菌的分離與鑒定[J];東北農(nóng)業(yè)大學學報;2010年11期

3 丁軻,倪學勤,潘康成,余祖華;三株乳酸桿菌體外抑菌試驗的研究[J];飼料工業(yè);2003年03期

4 呂兆林;林西;鄧文紅;歐陽囈林;張柏林;;HPLC法測定蘋果酒中蘋果酸及乳酸含量[J];精細與專用化學品;2012年01期

5 顧會詠;張昊;郭慧媛;任發(fā)政;;乳桿菌安全性評價研究進展[J];中國乳業(yè);2012年01期

6 李東明;蔣麗瀟;;皮膚細菌感染的病因、癥狀、診斷和治療[J];皮膚性病診療學雜志;2011年03期

7 吳敬;芒來;王英麗;包秋華;;馬奶酒中產(chǎn)抑菌物質(zhì)乳桿菌的篩選及鑒定[J];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版);2011年01期

8 佟長順;專家門診3503例初診皮膚病臨床分析[J];皮膚病與性病;2005年01期

9 張楊;孟祥晨;;自然發(fā)酵酸菜中乳桿菌的分離鑒定與多態(tài)性分析[J];中國乳品工業(yè);2009年02期

10 金世琳;乳酸菌的科學與技術[J];中國乳品工業(yè);1998年02期

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本文編號：703960