發(fā)布時(shí)間：2017-08-19 03:14

  本文關(guān)鍵詞：成都地區(qū)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥機(jī)制和同源性分析

  更多相關(guān)文章： 鮑曼不動(dòng)桿菌 碳青霉烯酶 外排泵 DiversiLab系統(tǒng) 同源性

【摘要】：目的：篩選耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的菌株，從基因水平研究碳青霉烯酶和外排泵基因在耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌中的作用，分析成都地區(qū)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的同源性，為本地區(qū)醫(yī)院感染控制提供重要依據(jù)。 方法：1.收集成都地區(qū)臨床和醫(yī)院環(huán)境中分離的鮑曼不動(dòng)桿菌復(fù)合群160株，通過多重PCR對(duì)其中的鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行快速鑒定。2.采用瓊脂稀釋法檢測(cè)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)14種抗生素的耐藥性，篩選耐碳青霉烯類的鮑曼不動(dòng)桿菌。3.通過多重PCR檢測(cè)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的苯唑西林類酶（OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58和OXA-143）和PCR法檢測(cè)金屬酶（NDM-1、IMP、VIM和SIM），同時(shí)通過PCR檢測(cè)插入序列ISAba1及其與OXA酶的關(guān)系。4.采用PCR檢測(cè)外排泵基因AdeABC、AdeIJK和AbeM，熒光定量PCR分別檢測(cè)對(duì)碳青霉烯類敏感和耐藥菌株外排泵基因AdeABC、AdeIJK和AbeM的表達(dá)情況。5.應(yīng)用DiversiLab系統(tǒng)分析整個(gè)地區(qū)耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的同源性。 結(jié)果：1.多重PCR結(jié)果顯示，在160株鮑曼不動(dòng)桿菌復(fù)合群中有132株（132/160,82.5%）為鮑曼不動(dòng)桿菌。2.132株鮑曼不動(dòng)桿菌中篩選到79株耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌，耐藥率為59.84%（79/132）；藥敏結(jié)果顯示，，79株CRAB對(duì)常用抗生素有較高耐藥率，其中對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢吡肟，耐藥率分別為79.9%、84.8%，而其余抗生素耐藥率均大于90%。3.多重PCR結(jié)果顯示，在79株CRAB菌株中均檢測(cè)到OXA-51和OXA-23，在20株碳青霉烯類敏感鮑曼不動(dòng)桿菌中只檢測(cè)OXA-51，未檢測(cè)到OXA-23；僅有一株檢出IMP基因，其余碳青霉烯酶基因均未檢測(cè)到，提示產(chǎn)OXA-23基因可能是CRAB的主要耐藥機(jī)制之一；PCR結(jié)果顯示，在79株CRAB菌株中均檢測(cè)到ISAba1序列，同時(shí)在77株CRAB菌株中檢測(cè)到ISAba1-OXA-23結(jié)構(gòu)，且通過測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)ISAba1存在于OXA-23基因上游；同時(shí)發(fā)現(xiàn)含有ISAba1-OXA-23結(jié)構(gòu)的77株CRAB菌株對(duì)碳青霉烯類抗生素完全耐藥，而不含ISAba1-OXA-23結(jié)構(gòu)的2株CRAB菌株對(duì)其中一種碳青霉烯類抗生素敏感，提示ISAba1-OXA-23結(jié)構(gòu)可能與CRAB耐藥相關(guān)。4. PCR結(jié)果顯示,79株CRAB菌株擴(kuò)增外排泵基因AdeB、AdeJ和AbeM的陽性率分別為58.2%、96.2%和97.5%，20株敏感鮑曼不動(dòng)桿菌擴(kuò)增外排泵AdeB、AdeJ和AbeM的陽性率分別為25%、85%和95%，說明對(duì)碳青霉烯類敏感和耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌均可檢測(cè)到外排泵基因，提示外排泵基因表達(dá)及其表達(dá)調(diào)控可能與鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類耐藥有關(guān)。5.熒光定量PCR結(jié)果顯示，CRAB菌株的外排泵AdeJ基因表達(dá)量比CSAB菌株增加了5.59倍，而外排泵AdeB和AbeM表達(dá)量無明顯變化，提示AdeJ基因表達(dá)量的改變與CRAB的耐藥有關(guān)。6.DiversiLab系統(tǒng)將40株代表性CRAB菌株分為4個(gè)不同親緣關(guān)系的克隆組及9個(gè)亞克隆組，其中克隆組1為最流行的克隆，且在5家醫(yī)院都有分布，提示CRAB克隆組1在整個(gè)地區(qū)存在播散的可能。 結(jié)論：1.通過分子生物學(xué)方法和瓊脂稀釋法藥敏試驗(yàn)準(zhǔn)確篩選出CRAB菌株。2.整個(gè)成都地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素和其他常用抗生素耐藥廣泛，并存在多重耐藥的現(xiàn)象。3.鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗生素的一個(gè)主要機(jī)制是產(chǎn)生OXA-23酶，ISAba1存在于OXA-23基因上游，且ISAba1-OXA-23結(jié)構(gòu)可能與CRAB耐藥相關(guān)。4.對(duì)碳青霉烯類敏感或耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌均可存在外排泵基因，外排泵AdeIJK基因表達(dá)增高可能是CRAB耐藥的原因之一。5.CRAB在成都地區(qū)部分醫(yī)院內(nèi)和醫(yī)院間存在相同的流行克隆組，應(yīng)加強(qiáng)整個(gè)地區(qū)的鮑曼不動(dòng)桿菌感染的防控措施。
【關(guān)鍵詞】：鮑曼不動(dòng)桿菌 碳青霉烯酶 外排泵 DiversiLab系統(tǒng) 同源性
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R3416
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照5-6
• 摘要6-9
• ABSTRACT9-13
• 前言13-15
• 第一部分 鮑曼不動(dòng)桿菌的分子鑒定和抗菌藥物敏感性試驗(yàn)15-25
• 1 材料與方法15-21
• 2 結(jié)果21-23
• 3 討論23-25
• 第二部分 耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌的碳青霉烯酶基因和外排泵基因分析25-39
• 1 材料與方法26-32
• 2 結(jié)果32-37
• 3 討論37-39
• 第三部分 利用 DiversiLab 系統(tǒng)分析鮑曼不動(dòng)桿菌的同源性39-46
• 1 材料與方法39-41
• 2 結(jié)果41-44
• 3 討論44-46
• 全文總結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 文獻(xiàn)綜述53-66
• 參考文獻(xiàn)61-66
• 致謝66-67
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文67-68

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 趙旺勝;江淑芳;顧兵;吳姍姍;劉根焰;張巧娣;吳�，|;;南京地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌喹諾酮類藥物耐藥基因突變的研究[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2007年02期

2 王政;劉丁;陳萍;程曉斌;王豪;成瑤;;重癥監(jiān)護(hù)室產(chǎn)OXA-23碳青霉烯類酶的鮑曼不動(dòng)桿菌的分子流行病學(xué)研究[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年09期

本文編號(hào)：698331