本文關(guān)鍵詞：聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶誘導(dǎo)小鼠桶狀皮層錐體神經(jīng)元功能可塑性的機(jī)理

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【摘要】：目的：建立小鼠條件反射的動(dòng)物模型，采用電生理實(shí)驗(yàn)方法，研究條件反射建立后，小鼠桶狀皮層（BarrelCortex）錐體神經(jīng)元內(nèi)在特性和神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位編碼能力的變化及細(xì)胞學(xué)機(jī)制。 方法：1.條件反射模型的建立：選擇出生后10天的FVB-Tg（GadGFP）4570Swn/J小鼠，在行為學(xué)上建立小鼠胡須觸覺和嗅覺的條件反射動(dòng)物模型。以乙酸丁酯作為氣味源的無關(guān)刺激，經(jīng)過訓(xùn)練10天后變?yōu)闂l件刺激，非條件刺激是5Hz的胡須觸覺刺激。實(shí)驗(yàn)分為四組：空白對照組、嗅覺訓(xùn)練組、觸覺訓(xùn)練組、聯(lián)合訓(xùn)練組，應(yīng)用CanonHFR28視頻拍攝儀對小鼠行為學(xué)進(jìn)行拍攝，然后用會(huì)聲會(huì)影軟件分析小鼠觸須擺動(dòng)的頻率及屈曲的時(shí)間。 2．膜片鉗電生理實(shí)驗(yàn)：選擇出生后10天的FVB-Tg（GadGFP）4570Swn/J小鼠，，連續(xù)訓(xùn)練10天，條件反射模型建立后，用異氟烷麻醉藥吸入麻醉，迅速將大腦分離，做冠狀切片（400μm），然后將腦片置于氧合的人工腦脊液(ASCF)中，25°C下孵育1-2小時(shí)后轉(zhuǎn)移至灌流槽，在31°C下對腦片進(jìn)行灌流；采用IR-DIC光學(xué)顯微鏡(NikonE600FN)熒光顯微鏡定位大腦桶狀皮層錐體神經(jīng)元；運(yùn)用Axoclamp-200B放大器，電流鉗模式全細(xì)胞記錄方法研究小鼠大腦桶狀皮層錐體神經(jīng)元內(nèi)在特性（ARP；Vts；Vr；Input-Output)與動(dòng)作電位發(fā)放能力、發(fā)放精確性（ISI；SDST）和神經(jīng)元突觸傳遞效應(yīng)（自發(fā)性興奮性突觸后電流）的變化，信號數(shù)據(jù)輸入Clampex10.1進(jìn)行處理分析。 結(jié)果：1.行為學(xué)結(jié)果：（1）僅受嗅覺訓(xùn)練的小鼠，與空白對照組相比，小鼠胡須擺動(dòng)的頻率和屈曲的時(shí)間無明顯的變化。（2）受胡須觸覺訓(xùn)練的小鼠在訓(xùn)練前和訓(xùn)練10天后胡須擺動(dòng)的頻率增加，且屈曲時(shí)間延長（3）小鼠在接受胡須-嗅覺聯(lián)合訓(xùn)練10天后能建立起以乙酸丁酯氣味刺激為條件刺激的條件反射。在非條件反射上表現(xiàn)為胡須的擺動(dòng)頻率及回縮時(shí)間均顯著增加，且與觸覺訓(xùn)練組相比有顯著差異。 2.膜片鉗實(shí)驗(yàn)結(jié)果：（1）應(yīng)用膜片鉗方法，電流鉗模式實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，僅受嗅覺訓(xùn)練的小鼠與空白對照組相比其錐體神經(jīng)元的內(nèi)在特性無明顯的變化（P0.05），單純受觸覺訓(xùn)練的小鼠與空白對照組相比，錐體神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著增加，動(dòng)作電位間距ISI縮短(P0.05)，閾電位(Vts)降低(P0.05)，絕對不應(yīng)期縮短（P0.05）,單位時(shí)間內(nèi)發(fā)放動(dòng)作電位的個(gè)數(shù)（InputandOutput）增加(P0.05)；而受觸覺-嗅覺聯(lián)合訓(xùn)練的小鼠其錐體神經(jīng)元群集發(fā)放動(dòng)作電位的發(fā)放容量顯著增加，動(dòng)作電位間距ISI縮短(P0.01)，閾電位(Vts)降低(P0.01)，絕對不應(yīng)期縮短（P0.01）,單位時(shí)間內(nèi)發(fā)放動(dòng)作電位的個(gè)數(shù)（InputandOutput）增加(P0.01),且與觸覺訓(xùn)練組相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05)。（2）電壓鉗模式實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，僅受嗅覺訓(xùn)練的小鼠與空白對照組相比，錐體神經(jīng)元的sEPSCs的電流間距、電流幅度無明顯的變化(P0.05)，受觸覺訓(xùn)練的小鼠與空白對照組相比，錐體神經(jīng)元的sEPSCs的電流間距縮短（P0.05）、電流幅度增加(P0.05)。受觸覺-嗅覺聯(lián)合訓(xùn)練的小鼠與空白對照組相比，錐體神經(jīng)元的sEPSCs的電流間距縮短（P0.01），電流幅度增加(P0.01)且與觸覺訓(xùn)練鼠相比有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論：1.小鼠觸須重復(fù)受到刺激后敏感性增加，可能發(fā)生了易化性的可塑性變化。2.小鼠在受到聯(lián)合訓(xùn)練后，形成了聯(lián)合記憶，這進(jìn)一步證明了BarrelCortex和PiriformCortex之間存在著某種聯(lián)系。3.聯(lián)合訓(xùn)練組的小鼠比觸覺訓(xùn)練組小鼠桶狀皮層錐體神經(jīng)元內(nèi)在特性增加更為明顯，由此我們推斷聯(lián)合式學(xué)習(xí)記憶可能更優(yōu)于單純的經(jīng)驗(yàn)依賴性學(xué)習(xí)記憶。
【關(guān)鍵詞】：嗅覺 胡須觸覺 條件反射 桶狀皮層 錐體神經(jīng)元 全細(xì)胞記錄 電壓鉗 電流鉗
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R338
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 1．引言9-13
• 2. 材料與方法13-19
• 2.1 動(dòng)物和分組13
• 2.2 神經(jīng)元選擇13-14
• 2.3 主要試劑和材料14
• 2.4 儀器設(shè)備14-15
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法15-18
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理和分18-19
• 3. 結(jié)果19-32
• 3.1 行為學(xué)結(jié)果19-21
• 3.2 小鼠桶狀皮層錐體神經(jīng)元電生理測試21-32
• 4. 討論32-35
• 5. 結(jié)論35-36
• 6. 參考文獻(xiàn)36-39
• 7. 致謝39-40
• 附錄 A 英文縮略語對照表40-41
• 附錄 B 常用試劑配制41-43
• 附錄 C 個(gè)人簡歷及發(fā)表論文43-44
• 附錄 D 綜述正文44-52
• 參考文獻(xiàn)51-52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 楊勝,張永祥;細(xì)胞因子與長時(shí)程增強(qiáng)[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2003年01期

2 譚潔;羅敏敏;;嗅球?qū)π嵊X信息的處理[J];生物物理學(xué)報(bào);2010年03期

3 郭林,曹建民,田敏,徐曉陽,王琳,周鐵民;不同運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度對腎上腺原癌基因C-fos蛋白表達(dá)的作用[J];體育學(xué)刊;2002年03期

本文編號：693407