CHO-K1細(xì)胞簇集法檢測百日咳毒素毒性的優(yōu)化及驗證
發(fā)布時間:2017-08-16 20:34
本文關(guān)鍵詞:CHO-K1細(xì)胞簇集法檢測百日咳毒素毒性的優(yōu)化及驗證
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【摘要】:目的對CHO-K1細(xì)胞簇集法檢測百日咳毒素(pertussis toxin,PT)毒性進行優(yōu)化及驗證。方法以國家PT標(biāo)準(zhǔn)品為參考品,將PT標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋后與CHO-K1細(xì)胞混合培養(yǎng),顯微鏡觀察PT能引起CHO-K1細(xì)胞簇集的程度。對細(xì)胞濃度、孵育時間進行優(yōu)化,并對方法的特異性、敏感度、重復(fù)性進行驗證。結(jié)果方法的最佳細(xì)胞濃度為2.5×105個/ml,最佳孵育時間為24 h。只有PT活性成分能使CHO-K1細(xì)胞發(fā)生簇集,最低檢測限為10 pg/ml;2名試驗員6次檢測結(jié)果表明,該方法重復(fù)性良好。結(jié)論 CHO-K1細(xì)胞簇集法可及時、準(zhǔn)確地檢測出生產(chǎn)過程中PT含量,適用于百日咳發(fā)酵過程監(jiān)測。
【作者單位】: 浙江衛(wèi)信生物藥業(yè)有限公司;
【關(guān)鍵詞】: CHO-K細(xì)胞 百日咳毒素 簇集
【分類號】:R378.42
【正文快照】: 百日咳疫苗是通過培養(yǎng)百日咳桿菌,收集其產(chǎn)生的百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、絲狀血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)等有效抗原成分制成的疫苗。在百日咳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)過程中,PT會隨著培養(yǎng)時間的增加而降解,為了獲得較高含量的PT,需通過快捷、準(zhǔn)確的方法對PT含量進行
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 侯啟明,張路民,梁雅文,秦進才;應(yīng)用CHO細(xì)胞法檢測百日咳疫苗中的殘余毒性[J];中國生物制品學(xué)雜志;1997年02期
2 劉?,肖詹榮,付春暉,郭強,葉娟,唐巧英;無細(xì)胞百日咳疫苗中活性PT的保護作用[J];中國生物制品學(xué)雜志;2003年06期
【共引文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 夏德菊;潘殊男;楊云凱;周第;金蕭;王s,
本文編號:685431
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