本文關(guān)鍵詞：用非整合重編程技術(shù)構(gòu)建人外周血單個核細(xì)胞來源的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞

  更多相關(guān)文章： 人外周血單個核細(xì)胞 重編程 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 非整合 仙臺病毒

【摘要】：目的用非整合重編程技術(shù)構(gòu)建人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)來源誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(i PSC)。方法收集健康人外周血標(biāo)本,分離PBMC,用含4個重編程轉(zhuǎn)錄因子(OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC)的仙臺病毒感染PBMC,并用無飼養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)體系培育獲得i PSC。通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)、堿性磷酸酶(AP)染色、免疫熒光染色、擬胚體形成和分化實驗對i PSC細(xì)胞進(jìn)行多能性驗證;用核型分析和仙臺病毒基因組RNA檢測對其進(jìn)行安全性驗證。結(jié)果在仙臺病毒感染后16 d后,PBMC出現(xiàn)i PSC樣克隆。i PSC可進(jìn)行傳代培養(yǎng),且經(jīng)多能性驗證實驗證明其具有多能性;安全性驗證結(jié)果表明,i PSC核型正常,外源性病毒基因組RNA可被完全清除。結(jié)論建立了對PBMC進(jìn)行非整合重編程的誘導(dǎo)體系,并獲得了具有多能性、核型正常且不含外源基因的i PSC。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心;
【關(guān)鍵詞】： 人外周血單個核細(xì)胞 重編程 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 非整合 仙臺病毒
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81300495) 江蘇省臨床醫(yī)學(xué)重點項目(BL2012039) 江蘇省衛(wèi)生廳科學(xué)項目(H201343)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 2006年,日本科學(xué)家Shinya Yamanaka首次通過4個重要的轉(zhuǎn)錄因子OCT3/4、SOX2、KLF4和c-MYC實現(xiàn)對已分化體細(xì)胞的重編程,從而得到與胚胎干細(xì)胞類似的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(i PSC)[1]。目前,包括皮膚成纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、牙髓細(xì)胞等在內(nèi)的人類細(xì)胞重編程技術(shù)已非常完善[2-4],然而,對

【相似文獻(xiàn)】

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