發(fā)布時間：2017-08-16 03:23

  本文關(guān)鍵詞：裂谷熱病毒Gn蛋白主要抗原區(qū)的表達、純化及抗原性分析

  更多相關(guān)文章： 裂谷熱病毒 Gn蛋白 原核表達 蛋白純化

【摘要】：目的通過原核表達系統(tǒng)制備裂谷熱病毒Gn片段主要抗原區(qū)蛋白,獲取純化蛋白,并分析抗原性。方法將合成的裂谷熱Gn基因用PCR的方法擴增具有保護性抗原表位的兩段Gn1和Gn2,并將其定向插入原核表達質(zhì)粒pColdⅠ中,構(gòu)建重組表達質(zhì)粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)感受態(tài)中,以IPTG誘導(dǎo)表達,SDS-PAGE分析表達蛋白和表達量,并利用His-tag Ni柱進行親和層析純化,Western-blot鑒定表達蛋白。結(jié)果所構(gòu)建的質(zhì)粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正確,SDS-PAGE檢測到目的蛋白,Western-blot顯示截斷的Gn蛋白具有很好反應(yīng)原性。結(jié)論成功純化了裂谷熱病毒Gn主要抗原區(qū)的表達蛋白。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 裂谷熱病毒 Gn蛋白 原核表達 蛋白純化
【基金】：國家科技支撐計劃(2013BAD12B05) 國家自然科學(xué)基金(31302116) 上海高校青年教師培養(yǎng)資助計劃(ZZnlzl2003) 上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院院級科研項目(091227)~~
【分類號】：R373
【正文快照】： (1.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China;2.College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang550025,China;3.Department of Animal Science and Technology,Shanghai Vocationaland Technical Col

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王清華;王喜軍;胡森;葛金英;步志高;林祥梅;;裂谷熱病毒囊膜蛋白基因DNA免疫的研究[J];微生物學(xué)報;2007年04期

2 龐衛(wèi)軍,楊公社,曹景峰,龍火生,向釗,張保軍;豬H-FABP基因PCR-RFLP分子標(biāo)記研究[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2004年07期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;Sequencing of Intron 3 of Porcine Heart Fatty Acid-Binding Protein Gene[J];Animal Husbandry and Feed Science;2012年01期

2 楊文平;李超;張紅梅;吳鵬;李明;沈海娥;王明艷;曹果清;周忠孝;;豬H-FABP基因內(nèi)含子3多態(tài)片段的序列分析[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年09期

3 楊文平;張家琦;李彩桃;王明艷;張紅梅;李超;曹果清;周忠孝;;豬H-FABP基因intron3全序列測定[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年05期

4 李林;高玉偉;胡桂學(xué);夏咸柱;趙國良;卜祥泉;;裂谷熱研究進展[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2011年02期

5 高妍;肖書奇;李毅;趙中利;袁寶;張嘉保;趙志輝;;松遼黑豬H-FABP基因位點多態(tài)性研究[J];中國畜牧獸醫(yī);2007年03期

6 楊龍;張冬杰;汪曉鴻;王文濤;劉琪;劉娣;;豬的RBP4基因部分序列的克隆及多態(tài)性分析[J];華北農(nóng)學(xué)報;2007年02期

7 馬煥;黃大鵬;邢沈陽;孫博興;趙志輝;;軍牧1號白豬肉質(zhì)主效基因的多態(tài)性檢測[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年11期

8 吳岳;李旭;劉國武;;國境口岸加強對裂谷熱早期預(yù)警的措施探討[J];口岸衛(wèi)生控制;2014年04期

9 梁梓;鄭玉才;王永;傅昌秀;金素鈺;王金玲;於建國;;草地藏系綿羊心臟脂肪酸結(jié)合蛋白基因第二內(nèi)含子的克隆和測序[J];草業(yè)與畜牧;2007年02期

10 黃大鵬;黃玉蘭;陳建華;;三江白豬心臟脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)基因多態(tài)性及多態(tài)片段的序列分析[J];中國獸醫(yī)學(xué)報;2008年03期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 楊文平;豬H-FABP基因分子遺傳多態(tài)性及其與肌內(nèi)脂肪含量的關(guān)聯(lián)分析[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 高煥;中國對蝦基因組串聯(lián)重復(fù)序列分析及其分子標(biāo)記的開發(fā)與應(yīng)用[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2006年

3 廖梅杰;鰱、鳙魚遺傳連鎖圖譜構(gòu)建和鳙魚蛋白感染因子基因的克隆[D];中國海洋大學(xué);2007年

4 朱淑斌;姜曲海豬肉質(zhì)特性及其分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)的研究[D];揚州大學(xué);2013年

5 李士龍;甜菜細胞質(zhì)雄性不育性的分子特性及育種應(yīng)用研究[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 李冬立;雞IMF雙向選擇效果及相關(guān)基因遺傳分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2007年

2 李健;北京油雞肉質(zhì)與繁殖性狀及相關(guān)候選基因研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年

3 趙衍銅;蘆花雞等三種優(yōu)質(zhì)肉雞肌肉品質(zhì)及H-FABP基因表達豐度的比較研究[D];吉林大學(xué);2013年

4 李慧霞;羊痘病毒ORF95和ORF103的表達及iELISA方法研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

5 邵佳;山羊痘病毒ORF31、ORF117、ORF72基因的原核表達及磷酸酶活力分析[D];寧夏大學(xué);2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 曹紅鶴,李宏濱,王立賢;FABPs作為豬肌內(nèi)脂肪沉積候選基因的研究進展[J];國外畜牧科技;1999年06期

2 王喜軍;胡森;葛金英;王清華;秦立廷;步志高;;重組桿狀病毒表達尼帕病毒融合蛋白和受體結(jié)合蛋白的研究[J];生物工程學(xué)報;2006年03期

3 林萬華,黃路生,任軍,鄧素華,王文君,劉寶生,周利華,陳從英;中外十個豬種H-FABP基因遺傳變異的研究[J];遺傳學(xué)報;2002年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王清華;王喜軍;胡森;葛金英;步志高;林祥梅;;裂谷熱病毒囊膜蛋白基因DNA免疫的研究[J];微生物學(xué)報;2007年04期

2 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李林;王志亮;陳繼明;魏榮;;裂谷熱的流行傳播、控制及其風(fēng)險分析[A];人畜共患傳染病防治研究新成果匯編[C];2004年

2 包靜月;王志亮;李林;李金明;;裂谷熱病毒的分子生物學(xué)研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會成立大會暨第一次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

3 王彩霞;吳紹強;;裂谷熱病毒LUX熒光PCR檢測方法的建立[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集（下冊）[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張見麟;裂谷熱與厄爾尼諾[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

2 張見麟;厄爾尼諾卷土重來裂谷熱會大流行嗎[N];健康報;2007年

3 馮武勇;“裂谷熱”是如何防住的？氣象預(yù)報[N];新華每日電訊;2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王清華;裂谷熱診斷與免疫防制技術(shù)的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 李林;裂谷熱病毒Real-time PCR檢測方法的建立及其G2部分蛋白的原核表達[D];揚州大學(xué);2004年

，

本文編號：681242