本文關(guān)鍵詞：裂谷熱病毒Gn蛋白主要抗原區(qū)的表達(dá)、純化及抗原性分析

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【摘要】：目的通過(guò)原核表達(dá)系統(tǒng)制備裂谷熱病毒Gn片段主要抗原區(qū)蛋白,獲取純化蛋白,并分析抗原性。方法將合成的裂谷熱Gn基因用PCR的方法擴(kuò)增具有保護(hù)性抗原表位的兩段Gn1和Gn2,并將其定向插入原核表達(dá)質(zhì)粒pColdⅠ中,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2,并將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)感受態(tài)中,以IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS-PAGE分析表達(dá)蛋白和表達(dá)量,并利用His-tag Ni柱進(jìn)行親和層析純化,Western-blot鑒定表達(dá)蛋白。結(jié)果所構(gòu)建的質(zhì)粒pColdⅠ-Gn1和pColdⅠ-Gn2序列正確,SDS-PAGE檢測(cè)到目的蛋白,Western-blot顯示截?cái)嗟腉n蛋白具有很好反應(yīng)原性。結(jié)論成功純化了裂谷熱病毒Gn主要抗原區(qū)的表達(dá)蛋白。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 裂谷熱病毒 Gn蛋白 原核表達(dá) 蛋白純化
【基金】：國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2013BAD12B05) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31302116) 上海高校青年教師培養(yǎng)資助計(jì)劃(ZZnlzl2003) 上海農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院院級(jí)科研項(xiàng)目(091227)~~
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： (1.Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China;2.College of Animal Science,Guizhou University,Guiyang550025,China;3.Department of Animal Science and Technology,Shanghai Vocationaland Technical Col

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：681242