本文關(guān)鍵詞：云南曼谷并殖吸蟲初步調(diào)查及其囊蚴形態(tài)學(xué)觀察和遺傳標(biāo)記分析

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【摘要】：[目的]對云南省曼谷并殖吸蟲的地理分布、自然界第二中間宿主的種類、適宜的實驗終宿主等進(jìn)行研究,并對曼谷并殖吸蟲的中間宿主種類及感染情況、囊蚴的形態(tài)特征進(jìn)行觀察和描述。應(yīng)用形態(tài)學(xué)分類和DNA序列分析相結(jié)合的方法深入研究曼谷并殖吸蟲的蟲種獨立性及其在并殖科吸蟲中的分類學(xué)地位；構(gòu)建基因進(jìn)化樹,闡明云南的曼谷并殖吸蟲與其他地區(qū)的曼谷并殖吸蟲或其它蟲種之間的同源性和親緣關(guān)系。 [方法]從云南南部的河口縣、馬關(guān)縣和西南部的滄源縣、保山市、隴川縣、普洱市、景洪市、勐臘縣等8個地州市的山澗溪流中采集第二中間宿主溪蟹,分離囊蚴,經(jīng)形態(tài)觀察、測量鑒定后,感染實驗動物家貓；試劑盒提取囊蚴DNA,利用ITS2和COI引物經(jīng)PCR體外擴(kuò)增獲得ITS2和COI基因序列,通過GenBank的Blast軟件同源性比較,使用MEGA5.0軟件構(gòu)建基因進(jìn)化樹。 [結(jié)果]本研究從云南南部和西南部的8個地州市的17條溪流中共采獲859只溪蟹,僅在景洪市和勐臘縣兩地的景洪溪蟹體內(nèi)檢獲31個曼谷并殖吸蟲囊蚴,其他6個地州市均為陰性。景洪市與勐臘縣的曼谷并殖吸蟲第二中間宿主—景洪溪蟹的自然感染率分別為2.33%和11.1%；感染度分別為1.2和1.25個。 囊蚴呈圓形或類圓形,具二層囊壁,外壁薄而脆且易破,內(nèi)壁堅韌,內(nèi)外壁之間有寬大的空隙。測量25個活體囊蚴,其中有8個具有外層囊壁,其大小平均為(551.25±29.40)μmx(512.66±33.74)μm,外壁厚度平均為(5.67±1.61)μm；17個脫去外壁的囊蚴大小平均為(465.64±23.38)μm×(438.84±23.50)μm,內(nèi)壁厚度平均為(9.77±2.80)μm。囊蚴最顯著的特征是后尾蚴在囊腔內(nèi)多蜷曲成“U”形,排泄囊抵達(dá)腸叉后,后尾蚴與內(nèi)層囊壁之間有較大的空隙,蚴體在囊腔內(nèi)活動自如。本實驗人工感染2只家貓均未獲得成蟲。 云南省景洪市與勐臘縣的曼谷并殖吸蟲囊蚴的ITS2和CO1基因序列通過Blast同源性比較分析表明,其ITS2和COI基因與越南的曼谷并殖吸蟲的同源性分別為100%和99%；與泰國的曼谷并殖吸蟲的同源性分別為100%和96%；與泰國的哈氏并殖吸蟲的同源性分別為99%和95%；與越南的哈氏并殖吸蟲的同源性分別為98%和94%；與中國云南是小睪并殖吸蟲的同源性分別為98%和93%。ITS2基因進(jìn)化樹顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲與已報道的越南、泰國和云南的曼谷并殖吸蟲,越南、泰國的哈氏并殖吸蟲,云南的小睪并殖吸蟲以100%的置信度構(gòu)成一大支,獨立于其他蟲種之外。COI基因進(jìn)化樹顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲與越南和云南的曼谷并殖吸蟲均先以65%的置信度聚為兩支,再以99%的置信度聚為一支,此支又與泰國的曼谷并殖吸蟲以93%的置信度聚為成一支。 [結(jié)論]本研究獲得的并殖吸蟲囊蚴形態(tài),與萬雅芳等2011年自勐臘縣報道的曼谷并殖吸蟲囊蚴形態(tài)、以及其他地區(qū)報道的曼谷并殖吸蟲囊蚴形態(tài)一致,符合曼谷并殖吸蟲囊蚴的形態(tài)學(xué)特征。首次證實景洪市也是曼谷并殖吸蟲的分布區(qū),但其第二中間宿主的感染率遠(yuǎn)低于勐臘縣；景洪溪蟹是云南曼谷并殖吸蟲的第二中間宿主；家貓對曼谷并殖吸蟲的易感性差,可能不是其適宜的實驗終宿主。DNA序列分析顯示,本研究的曼谷并殖吸蟲與已報道的云南、越南和泰國的曼谷并殖吸蟲同源性極高,為同一蟲種；與越南、泰國的哈氏并殖吸蟲和云南的小睪并殖吸蟲的親緣關(guān)系較近,為近緣蟲種。
【關(guān)鍵詞】：并殖吸蟲 曼谷并殖 囊蚴形態(tài) DNA序列 云南省
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R383.23
【目錄】：

• 目錄5-6
• 摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-44
• 討論44-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 綜述56-63
• 參考文獻(xiàn)61-63
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況63-64
• 致謝64

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：669113