PTEN調(diào)節(jié)神經(jīng)樣細(xì)胞微管相關(guān)蛋白tau的聚集及意義
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【摘要】:目的觀察體外誘導(dǎo)成人骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)向神經(jīng)細(xì)胞分化過程中,在第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源物基因(PTEN)調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架中軸突標(biāo)志分子微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)分布及聚集的特征,并探討其意義。方法從成人骨髓中分離基質(zhì)干細(xì)胞,在體外經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化2周后成為神經(jīng)樣細(xì)胞,將未分化的BMSC作為對(duì)照組;應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Western blot方法研究MAPT的表達(dá)變化;經(jīng)PTEN抑制劑BPV作用于該細(xì)胞后,用結(jié)合有熒光劑的鬼筆環(huán)肽直接染色細(xì)胞微絲肌動(dòng)蛋白,并聯(lián)合用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法染色MAPT,在激光共聚焦顯微鏡下觀察MAPT和肌動(dòng)蛋白的定位及關(guān)聯(lián)性。結(jié)果成人骨髓來源的基質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后,MAPT的m RNA在分化1周和2周時(shí)相對(duì)表達(dá)水平為0.24±0.04和0.52±0.04,高于對(duì)照組BMSC的0.04±0.02(P0.05)。MAPT蛋白表達(dá)水平分別為0.18±0.03和0.44±0.05,高于對(duì)照組0.06±0.04(P0.05)。細(xì)胞染色后,經(jīng)BPV作用后MAPT由彌散狀態(tài)變?yōu)榫奂癄顟B(tài),并分布于細(xì)胞一側(cè),神經(jīng)樣細(xì)胞開始出現(xiàn)極性。結(jié)論 BMSC來源的神經(jīng)細(xì)胞分化成熟時(shí),PTEN參與調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架中軸突標(biāo)志分子MAPT的轉(zhuǎn)運(yùn)和聚集,為神經(jīng)細(xì)胞的軸突進(jìn)一步生長(zhǎng)提供物質(zhì)支持。
【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué)研究生院;天津市天津醫(yī)院骨科;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 腫瘤抑制蛋白質(zhì)類 tau蛋白質(zhì)類 細(xì)胞骨架 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) 免疫熒光測(cè)定 第號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源物基因
【分類號(hào)】:R3416
【正文快照】: 微管相關(guān)蛋白是細(xì)胞骨架中微管主干蛋白之外義鏈0.5μL,25μmol/L反義鏈0.5μL,10 U/μLTaq DNA合的一些蛋白成分,占微管總蛋白成分的5%~20%,成酶0.125μL,c DNA 2.5μL,加去DEPC水至25μL。PCR其中微管相關(guān)蛋白tau(microtubule-associated pro-程序?yàn)?5℃3 min,94℃30 s,根據(jù)
【共引文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 李香琴;劉天慶;宋克東;葛丹;馬學(xué)虎;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)海藻酸鈣膠珠內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞增殖與分化的作用[J];高;瘜W(xué)工程學(xué)報(bào);2013年02期
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 李香琴;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外擴(kuò)增及其與神經(jīng)類細(xì)胞共培養(yǎng)的研究[D];大連理工大學(xué);2012年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
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2 王祥強(qiáng);紅花黃素體外誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2014年
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
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7 李盛華;郭平德;王文晶;;中藥誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];中國(guó)骨傷;2010年03期
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10 周俊松;董運(yùn)海;錢燕翔;徐路堯;宋琳;宋雪慧;辛蓮;張煥相;;大鼠大腦皮層細(xì)胞條件培養(yǎng)液促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的研究[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年05期
中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 陳麗;井緒東;何冬梅;張洹;房寶英;;體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)樣細(xì)胞分化的研究[A];第11次中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年
2 陳澄;陳譽(yù)華;;大腸桿菌ibeB基因誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞分化成神經(jīng)樣細(xì)胞[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)、免疫細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2002年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
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2 尚德淑;鼠胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2003年
3 朱天琦;GDNF和NT-3雙基因誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2013年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 周俊松;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化過程的可塑性研究[D];蘇州大學(xué);2008年
2 夏冰;終絲誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞[D];鄭州大學(xué);2006年
3 張雪;大腦神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子促進(jìn)骨骼肌肌源性干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2009年
4 南成睿;川芎嗪體外誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年
5 鄭煜;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外定向分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年
6 閆冬冬;黃連素體外誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年
7 王冠;堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的影響[D];蘭州大學(xué);2014年
8 宋琳;抑制Rac1表達(dá)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的影響研究[D];蘇州大學(xué);2008年
9 徐路堯;Rac1與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化過程關(guān)系的研究[D];蘇州大學(xué);2008年
10 胡泳菊;骨髓源神經(jīng)樣細(xì)胞移植對(duì)兔SCSG受損修復(fù)作用的研究[D];南華大學(xué);2014年
,本文編號(hào):645493
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