本文關鍵詞：人脂肪干細胞的提取和鑒定

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【摘要】：背景:脂肪干細胞是存在于脂肪中的全能干細胞,具備自我更新能力與多向分化潛能,遺傳背景相當穩(wěn)定,體內植入后免疫排斥少,是一種比較理想的種子細胞。目的:提取人大網(wǎng)膜脂肪干細胞,并進行成脂和成骨分化能力鑒定。方法:收集手術患者大網(wǎng)膜的脂肪組織,經(jīng)Ⅰ型膠原酶消化、過濾、離心后進行原代培養(yǎng),觀察細胞生長狀態(tài);用細胞計數(shù)法繪制人脂肪干細胞增殖曲線,計算處于對數(shù)生長期的倍增時間;用相應的定向誘導液誘導人脂肪干細胞向脂肪細胞及骨細胞方向分化,并用油紅O染色、茜素紅染色進行鑒定。結果與結論:從手術患者大網(wǎng)膜脂肪組織中成功分離人脂肪干細胞,貼壁生長的人脂肪干細胞為長梭形,形態(tài)類似成纖維細胞。第3代人脂肪干細胞生長曲線呈S形,對數(shù)生長期人脂肪干細胞的倍增時間為45.90 h。人脂肪干細胞經(jīng)成脂、成骨定向誘導分化2,3周后,油紅O染色顯示細胞內有大小不等的橘紅色脂肪滴,茜素紅染色可見著橘紅色的典型鈣化結節(jié),提示所培養(yǎng)的脂肪干細胞具有向脂肪細胞、骨細胞系分化的能力。
【作者單位】： 中南大學湘雅醫(yī)學院附屬腫瘤醫(yī)院老干頭頸內科;中南大學湘雅三醫(yī)院內分泌科;中南大學湘雅三醫(yī)院營養(yǎng)科;
【關鍵詞】： 脂肪組織 干細胞 膠原酶類 細胞 培養(yǎng)的 細胞分化 脂肪干細胞 誘導分化 人脂肪干細胞 Ⅰ型膠原酶 生長曲線 脂肪細胞 骨細胞 大網(wǎng)膜 油紅O染色 茜素紅染色
【基金】：湖南省科技廳項目(2013SK3060)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction塊,0.2%Ⅰ型膠原蛋白酶消化后加入等體積培養(yǎng)基,200脂肪干細胞是脂肪組織中存在、類似骨髓基質細胞的目篩網(wǎng)過濾,收集濾液并離心,棄上清后加入3 m L紅細胞間充質干細胞,具備自我更新能力與多向分化潛能,遺傳裂解液吹打5 min,離心棄上清,PBS反復沖洗后在DMEM

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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本文編號：644462