本文關(guān)鍵詞：人脂肪干細(xì)胞的提取和鑒定

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【摘要】：背景:脂肪干細(xì)胞是存在于脂肪中的全能干細(xì)胞,具備自我更新能力與多向分化潛能,遺傳背景相當(dāng)穩(wěn)定,體內(nèi)植入后免疫排斥少,是一種比較理想的種子細(xì)胞。目的:提取人大網(wǎng)膜脂肪干細(xì)胞,并進(jìn)行成脂和成骨分化能力鑒定。方法:收集手術(shù)患者大網(wǎng)膜的脂肪組織,經(jīng)Ⅰ型膠原酶消化、過(guò)濾、離心后進(jìn)行原代培養(yǎng),觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài);用細(xì)胞計(jì)數(shù)法繪制人脂肪干細(xì)胞增殖曲線,計(jì)算處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的倍增時(shí)間;用相應(yīng)的定向誘導(dǎo)液誘導(dǎo)人脂肪干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞及骨細(xì)胞方向分化,并用油紅O染色、茜素紅染色進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:從手術(shù)患者大網(wǎng)膜脂肪組織中成功分離人脂肪干細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)的人脂肪干細(xì)胞為長(zhǎng)梭形,形態(tài)類(lèi)似成纖維細(xì)胞。第3代人脂肪干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈S形,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期人脂肪干細(xì)胞的倍增時(shí)間為45.90 h。人脂肪干細(xì)胞經(jīng)成脂、成骨定向誘導(dǎo)分化2,3周后,油紅O染色顯示細(xì)胞內(nèi)有大小不等的橘紅色脂肪滴,茜素紅染色可見(jiàn)著橘紅色的典型鈣化結(jié)節(jié),提示所培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞具有向脂肪細(xì)胞、骨細(xì)胞系分化的能力。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬腫瘤醫(yī)院老干頭頸內(nèi)科;中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院內(nèi)分泌科;中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)科;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪組織 干細(xì)胞 膠原酶類(lèi) 細(xì)胞 培養(yǎng)的 細(xì)胞分化 脂肪干細(xì)胞 誘導(dǎo)分化 人脂肪干細(xì)胞 Ⅰ型膠原酶 生長(zhǎng)曲線 脂肪細(xì)胞 骨細(xì)胞 大網(wǎng)膜 油紅O染色 茜素紅染色
【基金】：湖南省科技廳項(xiàng)目(2013SK3060)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction塊,0.2%Ⅰ型膠原蛋白酶消化后加入等體積培養(yǎng)基,200脂肪干細(xì)胞是脂肪組織中存在、類(lèi)似骨髓基質(zhì)細(xì)胞的目篩網(wǎng)過(guò)濾,收集濾液并離心,棄上清后加入3 m L紅細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞,具備自我更新能力與多向分化潛能,遺傳裂解液吹打5 min,離心棄上清,PBS反復(fù)沖洗后在DMEM

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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6 任志午;趙U，

本文編號(hào)：644462