發(fā)布時間：2017-08-08 23:04

  本文關鍵詞：人單核細胞系中HIV-1前病毒轉錄調節(jié)新型研究模型的建立

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【摘要】：【目的】抗反轉錄病毒療法(ART)能夠有效控制人免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus-1,HIV-1)的復制,但是不能將其完全清除。至2012年底,全球仍有3 500萬HIV-1感染者,同年約160萬人死于艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome,AIDS)及其相關疾病。HIV-1感染難以根治的主要原因之一是機體內HIV-1潛伏儲存庫(Reservoir)的存在。HIV-1潛伏儲存庫主要由CD4+T細胞和單核巨噬細胞構成,與CD4+T細胞相比,目前研究者對單核巨噬系細胞中HIV-1病毒復制機制尚不明了,且缺乏適宜的研究體系。因此,為探討單核細胞活化或分化信號對HIV-1復制的影響,我們建立了旨在研究HIV-1前病毒轉錄調控機制的人單核巨噬細胞系模型�！痉椒ā繕嫿╡nv區(qū)域移碼突變和nef區(qū)域攜帶EGFP或Nano Luc報告基因的HIV-1 NLn GFP-Kp或NLn Nano Luc-Kp重組病毒,分別感染2種人單核細胞系THP-1或U937細胞。通過有限稀釋法制備單克隆細胞系,利用流式細胞術或Nano Luc熒光素酶活性分析檢測報告基因的表達。篩選EGFP或Nano Luc陰性表達的細胞克隆,經激活劑佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后鑒定潛伏感染的細胞克隆�！窘Y果】研究中鑒定了4個HIV-1潛伏感染的細胞克隆。其中2個是表達EGFP的THP-1克隆,2個是以Nano Luc為報告基因的U937克隆。這些克隆在PMA刺激處理后皆有報告基因的表達,而在恒態(tài)條件下未檢測到報告基因的表達�！窘Y論】成功建立了4個HIV-1潛伏感染的人單核細胞系克隆,該模型有助于理解單核巨噬系細胞的HIV-1病毒復制機制,可能成為進一步研究HIV-1前病毒轉錄調控機制的有力工具。
【作者單位】： 安徽大學生命科學學院;中國科學院微生物研究所中日聯(lián)合實驗室;Research
【關鍵詞】： 人免疫缺陷病毒 前病毒 轉錄調控 單核巨噬細胞 細胞模型 再活化
【基金】：日本文部科學省“新生與再生傳染性疾病研究基地項目”(No.10005010)
【分類號】：R373;R3416
【正文快照】： 研究報告人單核細胞系中HIV-1前病毒轉錄調節(jié)新型研究模型的建立李陽1,2谷麗君2,3張宇2劉文軍4嚴景華4高福4巖本a吉2,5合田仁2,3石田尚臣2,3*(1.安徽大學生命科學學院安徽合肥230601)(2.中國科學院微生物研究所中日聯(lián)合實驗室北京100101)(3.Research Center for Asian Infect

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本文編號：642399