利用Gibson Assembly技術構建乙型肝炎病毒1.1倍體復制子
本文關鍵詞:利用Gibson Assembly技術構建乙型肝炎病毒1.1倍體復制子
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【摘要】:乙型肝炎病毒(HBV)基因組各開放閱讀框高度重疊,因此構建可在體外細胞模型中復制的HBV DNA質粒至少要包含1.1倍以上的HBV基因組.構建HBV1.1倍體復制子的傳統(tǒng)克隆方法涉及多步DNA酶切/連接,操作復雜,耗時較長.本研究發(fā)展了基于新型克隆技術Gibson Assembly構建HBV1.1倍體復制子質粒的新方法,在獲得HBV基因組DNA后僅需1步體外裝配即可完成,利用這一方法,本研究成功從4份HBV感染者標本中獲得HBV1.1倍體復制子,并通過瞬時轉染Huh7細胞,證明其能夠支持HBV的體外復制.本研究為從臨床標本中快速獲得HBV復制子克隆以研究病毒表型功能提供了更為高效的新方法.
【作者單位】: 廈門大學公共衛(wèi)生學院國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術研究中心;
【關鍵詞】: 乙型肝炎病毒 Gibson Assembly .倍體
【分類號】:R373.21
【正文快照】: 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是世界范圍內重要的公共衛(wèi)生問題之一[1].它通過血液、體液等傳播,HBV感染可導致急性或者慢性感染,急性感染有可能引起暴發(fā)性肝病,導致死亡,而對于慢性感染人群,則患肝硬化或肝癌的概率大大上升,全球慢性乙肝患者已經超過2億4千萬人,
【共引文獻】
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本文編號:640359
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