本文關(guān)鍵詞：利用Gibson Assembly技術(shù)構(gòu)建乙型肝炎病毒1.1倍體復(fù)制子

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【摘要】：乙型肝炎病毒(HBV)基因組各開放閱讀框高度重疊,因此構(gòu)建可在體外細(xì)胞模型中復(fù)制的HBV DNA質(zhì)粒至少要包含1.1倍以上的HBV基因組.構(gòu)建HBV1.1倍體復(fù)制子的傳統(tǒng)克隆方法涉及多步DNA酶切/連接,操作復(fù)雜,耗時(shí)較長.本研究發(fā)展了基于新型克隆技術(shù)Gibson Assembly構(gòu)建HBV1.1倍體復(fù)制子質(zhì)粒的新方法,在獲得HBV基因組DNA后僅需1步體外裝配即可完成,利用這一方法,本研究成功從4份HBV感染者標(biāo)本中獲得HBV1.1倍體復(fù)制子,并通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)染Huh7細(xì)胞,證明其能夠支持HBV的體外復(fù)制.本研究為從臨床標(biāo)本中快速獲得HBV復(fù)制子克隆以研究病毒表型功能提供了更為高效的新方法.
【作者單位】： 廈門大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 乙型肝炎病毒 Gibson Assembly .倍體
【分類號(hào)】：R373.21
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是世界范圍內(nèi)重要的公共衛(wèi)生問題之一[1].它通過血液、體液等傳播,HBV感染可導(dǎo)致急性或者慢性感染,急性感染有可能引起暴發(fā)性肝病,導(dǎo)致死亡,而對于慢性感染人群,則患肝硬化或肝癌的概率大大上升,全球慢性乙肝患者已經(jīng)超過2億4千萬人,

【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：640359