本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓來(lái)源肥大細(xì)胞的誘導(dǎo)培養(yǎng)及功能鑒定

  更多相關(guān)文章： 肥大細(xì)胞 骨髓 組胺檢測(cè) 誘導(dǎo)培養(yǎng) 小鼠

【摘要】：目的:探討體外誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓細(xì)胞來(lái)源肥大細(xì)胞的方法,為體外組胺激發(fā)試驗(yàn)提供試材。方法:采用白細(xì)胞介素3(IL-3)和干細(xì)胞因子(SCF)聯(lián)合刺激小鼠骨髓細(xì)胞4、6周誘導(dǎo)其分化為肥大細(xì)胞,光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),甲苯胺藍(lán)染色觀察細(xì)胞成熟度,蛋白免疫印跡法分析表面FcεRⅠ和CD117表達(dá)情況,HistaReader 501組胺儀檢測(cè)細(xì)胞脫顆粒能力。結(jié)果:誘導(dǎo)培養(yǎng)4、6周后的細(xì)胞為大小均一且具折光性的圓形懸浮細(xì)胞;甲苯胺藍(lán)染色顯示培養(yǎng)4、6周后的細(xì)胞胞核染為藍(lán)色,胞質(zhì)含有豐富的粗大紫紅色顆粒,鏡下統(tǒng)計(jì)成熟肥大細(xì)胞比例達(dá)85%以上;蛋白免疫印跡法分析發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)4、6周后的細(xì)胞皆表達(dá)FcεRⅠ和CD117,其中培養(yǎng)6周的細(xì)胞FcεRⅠ表達(dá)水平更高;組胺儀檢測(cè)培養(yǎng)6周的細(xì)胞發(fā)現(xiàn),經(jīng)濃度為100、500、1 000μmol·L-1的鈣離子載體刺激后,與陰性對(duì)照組相比,細(xì)胞組胺釋放量依次為3.86%、17.04%及23.47%(P0.05),其脫顆粒具有鈣離子載體濃度依賴性。結(jié)論:獲得大量高純度的小鼠骨髓來(lái)源肥大細(xì)胞,可促進(jìn)后期的組胺激發(fā)試驗(yàn)及Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)機(jī)制研究。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院/呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室變態(tài)反應(yīng)研究室/變態(tài)反應(yīng)國(guó)家臨床重點(diǎn)�？�/廣東省過(guò)敏反應(yīng)與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 肥大細(xì)胞 骨髓 組胺檢測(cè) 誘導(dǎo)培養(yǎng) 小鼠
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目(2014ZX08011-005B) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81373128) 國(guó)家臨床重點(diǎn)�？平ㄔO(shè)項(xiàng)目(520102)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： (Guangdong Provincial Key Laboratory of AllergyClinical Immunology,The State Key Clinical Specialtyin Allergy,The State Key Laboratory of Respiratory Disease,The Second Affiliated Hospitalof Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China)Ⅰ型變態(tài)反

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本文編號(hào)：634234