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TIGIT-Fc融合蛋白的表達(dá)以及對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-08-04 18:17

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【摘要】:目的:構(gòu)建攜帶小鼠TIGIT-Fc融合基因的慢病毒載體,穩(wěn)定整合基因至小鼠H22細(xì)胞,制備并純化TIGIT-Fc融合蛋白,探討其對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響。方法:利用分子生物學(xué)方法將小鼠TIGIT胞外段與人IgG3 Fc段基因融合,構(gòu)建分泌型TIGIT-Fc載體,再重組入慢病毒載體,感染小鼠H22細(xì)胞,接種至C57BL/6小鼠腹腔產(chǎn)生腹水,收集腹水后通過(guò)蛋白A柱純化獲得TIGIT-Fc融合蛋白,以此干預(yù)LPS處理的巨噬細(xì)胞,檢測(cè)其分泌IL-10的水平。結(jié)果:TIGIT-Fc蛋白在H22細(xì)胞中以分泌形式表達(dá),經(jīng)過(guò)純化后的TIGIT-Fc融合蛋白可在體外作用于高表達(dá)PVR受體的成熟巨噬細(xì)胞,促進(jìn)其分泌抗炎癥因子IL-10。結(jié)論:TIGIT可負(fù)調(diào)節(jié)成熟巨噬細(xì)胞的功能,促進(jìn)其分泌IL-10。
【作者單位】: 武漢市第一醫(yī)院血液科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【關(guān)鍵詞】TIGIT 巨噬細(xì)胞 PVR IL-
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81102260) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(HUST2012QN190)資助項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】:R392.11
【正文快照】: 眾多免疫調(diào)節(jié)分子只在特定的免疫細(xì)胞亞群上表達(dá),往往屬于免疫球蛋白超家族(Ig SF)成員,并具有免疫受體酪氨酸抑制/激活基序(ITIM/ITAM)。利用基因芯片技術(shù)對(duì)T細(xì)胞亞群全基因組掃描可發(fā)現(xiàn)特異的免疫反應(yīng)相關(guān)基因[1],再篩選具有免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域、ITIM/ITAM結(jié)構(gòu)域的特定靶分子,

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):621004

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