本文關(guān)鍵詞：磁標記兔脂肪干細胞與建立兔腰椎間盤退變模型及MR定量的研究

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【摘要】：第一部分兔脂肪間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)鑒定及體外磁標記MR成像 目的:研究兔脂肪間充質(zhì)干細胞（ADSCs）的培養(yǎng)鑒定方法，聯(lián)合應(yīng)用超順磁性氧化鐵（SPIO）和多聚賴氨酸（PLL）行體外磁標記細胞，并探討磁標記示蹤的可行性。 方法:分離、純化并培養(yǎng)兔ADSCs，流式細胞術(shù)鑒定細胞表面抗原CD90、CD44和CD34。應(yīng)用SPIO-PLL標記細胞，普魯士藍染色和透射電鏡檢測胞內(nèi)鐵粒子。體外3.0T MR分別對1×107個未標記細胞，，經(jīng)25、50、75μg/ml SPIO-PLL標記的1×107個細胞；1×107個ADSCs（標記1d）、1×107個（標記3d）和5×106個（標記1d）進行成像，包括T1WI、T2WI及T2*WI序列，并測量各組的信號強度和弛豫時間。 結(jié)果:第3代ADSCs純度高、排列規(guī)則、細胞呈漩渦狀，流式結(jié)果示CD44和CD90陽性表達率分別為99.2%、98.7%，CD34表達陰性。普魯士藍染色和透射電鏡示胞漿內(nèi)藍色顆粒，磁標記率近100%。MR示隨著SPIO-PLL的濃度增高，T2*WI和T2WI序列的信號強度變化較T1WI明顯。1×107個ADSCs（標記1d）的信號強度變化率較1×107個（標記3d）和5×106個（標記1d）大，T2*和T2弛豫時間與T1弛豫時間相比均有統(tǒng)計學(xué)意義（F=161.47，P0.05）,但T2*和T2弛豫時間相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F=5.88，P0.05）。 結(jié)論:通過分離純化培養(yǎng)可獲得足量的ADSCs，SPIO-PLL能夠有效標記ADSCs，體外可行MR細胞成像，以T2*WI和T2WI序列敏感。 第二部分髓核針刺抽吸法建立兔腰椎間盤退變模型及MR定量研究 目的:建立兔腰椎間盤退變模型并提高其退變機制的認識。 方法:18只新西蘭大白兔，側(cè)后方入路手術(shù)暴露腰椎間盤，18G穿刺針抽吸12只L2/3、L3/4、L4/5髓核，各約5mg，正常L1/2、L5/6和另6只L2-5間椎間盤分別為組內(nèi)和組間對照。術(shù)后第4、8、12周行MR矢狀位T2WI和T2-mapping序列檢查，取正中矢狀面觀察各椎間盤的信號并測量T2弛豫時間并與正常組比較。相應(yīng)各時間點取2只L1-6間椎間盤行HE和Masson染色，觀察纖維環(huán)形態(tài)、髓核細胞及基質(zhì)的變化并與正常組比較。 結(jié)果:椎間盤為一豆點大隆起，18G穿刺針經(jīng)脊柱旁路于橫突根部可成功穿刺抽吸髓核。正常椎間盤T2WI序列為均勻高信號，實驗組隨時間延長信號逐漸降低，第8周明顯降低，第12周基本完全呈低信號；第8周實驗組與正常組T2弛豫時間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05）。術(shù)后隨時間進展，HE和Masson染色示椎間盤細胞和膠原逐漸減少，纖維環(huán)和髓核分界不清；第8周髓核基質(zhì)退變纖維化，幾乎被纖維組織取代；第12周椎間盤纖維軟骨化，局部形成軟骨。 結(jié)論:髓核針刺抽吸法可成功建立兔腰椎間盤退變模型，MR可實時定量監(jiān)測退變程度，為椎間盤退變機制的動物實驗研究提供可靠的模型及影像學(xué)監(jiān)測方法。
【關(guān)鍵詞】：脂肪間充質(zhì)干細胞 超順磁性氧化鐵 磁標記 磁共振成像 體外 腰椎間盤 髓核抽吸 退變模型 磁共振成像 定量
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R445.2;R681.53;R-332
【目錄】：

• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-17
• 參考文獻16-17
• 第一部分 兔脂肪間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng)鑒定及體外磁記 MR 成像17-30
• 1 材料與方法17-20
• 2 結(jié)果20-22
• 3 討論22-24
• 4 小結(jié)24-25
• 參考文獻25-27
• 附圖與說明27-30
• 第二部分 髓核抽吸法建立兔腰椎間盤退變模型及 MR 定量研究30-42
• 1 材料和方法30-32
• 2 結(jié)果32-33
• 3.討論33-35
• 4 小結(jié)35-36
• 參考文獻36-38
• 附圖與說明38-42
• 文獻綜述42-52
• 參考文獻48-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果53-54

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 蔣新華;陳建宇;蔡兆熙;張婭;劉珍珍;謝傳淼;伍堯泮;吳沛宏;;SPIO標記脂肪干細胞移植退變椎間盤內(nèi)的MRI活體示蹤[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年40期

2 居勝紅,滕皋軍,毛曦,張愛鳳,張宇,馬明,顧寧;臍血間充質(zhì)干細胞磁探針標記和MR成像研究[J];中華放射學(xué)雜志;2005年01期

本文編號：617190