本文關(guān)鍵詞：HCV中和抗原表位與HBV S抗原嵌合病毒樣顆粒的制備及純化

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【摘要】：目的制備丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)中和抗原表位與HBV S抗原嵌合病毒樣顆粒(virus-like particles,VLPs),并進(jìn)行純化和鑒定。方法采用脂質(zhì)體法分別將4個(gè)HCV中和抗原表位與HBV S抗原嵌合重組表達(dá)載體p CI-HBSE1、p CI-HBSE2、p CI-HBSE3、p CI-HBSE4轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,48 h后收集培養(yǎng)上清,獲得自我裝配的嵌合HCV中和表位的HBV VLPs,分別命名為VLPs-SE1、VLPs-SE2、VLPs-SE3、VLPs-SE4,蔗糖密度梯度離心,透析濃縮后,電鏡觀察VLPs,電化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行HBs Ag定量,ELISA法檢測(cè)嵌合VLPs作為包被抗原與HCV感染患者血清的反應(yīng)。結(jié)果電鏡觀察可見4種嵌合VLPs,大小約為22 nm;濃度最高的VLPs-SE2 HBs Ag含量達(dá)5.51×103ng/ml,該濃度可滿足后續(xù)試驗(yàn)的要求;用混合VLPs作為包被抗原檢測(cè)的HCV感染患者血清中和抗體水平稍高于單一VLPs作為包被抗原檢測(cè)的水平。結(jié)論成功制備了HCV中和抗原表位與HBV S抗原嵌合VLPs,為進(jìn)一步評(píng)價(jià)VLPs體內(nèi)誘導(dǎo)的中和抗體及中和抗體的保護(hù)作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)輸血科;第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)部微生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 丙型肝炎病毒 中和抗原表位 乙型肝炎病毒 S抗原 嵌合 病毒樣顆粒
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81072500)
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。目前全球感染者約1.7億,每年新增300萬~400萬例,一些高發(fā)地區(qū)感染率甚至達(dá)10%~30%[1]。HCV感染有免疫力宿主后,仍有高達(dá)70%的存活可能性,可導(dǎo)致肝炎慢性化,并可發(fā)展為肝纖維化和肝硬化,最終導(dǎo)致肝衰竭或肝

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