本文關(guān)鍵詞：神經(jīng)干細(xì)胞移植治療大鼠無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的初步研究

  更多相關(guān)文章： 無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥 動(dòng)物模型 神經(jīng)干細(xì)胞 移植 功能改善

【摘要】：目的：探索建立適于神經(jīng)干細(xì)胞移植的巨結(jié)腸動(dòng)物模型的方法,并觀察研究該模型的的病理組織學(xué)特征。觀察神經(jīng)干細(xì)胞(Neural stem cells, NSCs)在腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的大鼠直腸壁內(nèi)移植的存活和分化情況以及腸運(yùn)動(dòng)和反射功能的改善情況,探討神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的治療作用 方法：清潔級(jí)8周齡SD (Sprague Dawley遠(yuǎn)交群)大鼠60只。雌雄不拘,體重(200±15)g,由天津醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,室溫單籠飼養(yǎng)。隨機(jī)分為2組：模型組(n=30)(采用BAC(苯扎氯胺)濕敷大鼠結(jié)腸腸壁；對(duì)照組(n=30)采用生理鹽水濕敷大鼠結(jié)腸腸壁)。術(shù)后通過大體解剖觀察各組對(duì)象結(jié)腸變化,HE染色觀察處理段結(jié)腸壁組織學(xué)改變。用0.5%苯扎氯銨溶液浸濕的脫脂棉緊貼腸壁包繞標(biāo)記段結(jié)腸一周45分鐘,濕敷范圍3cm。術(shù)后4周通過組織病理學(xué)觀察處理段結(jié)腸神經(jīng)細(xì)胞消失。將已成功建立腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥模型的SD大鼠60只,隨機(jī)分為2組。模型組用免疫熒光標(biāo)記的提純好的臍帶間允質(zhì)神經(jīng)干細(xì)胞150微升(濃度107/ml)分3處注入大鼠結(jié)腸腸壁,對(duì)照組用生理鹽水。并分別于注射后1-8周行大體觀察,免疫熒光顯微鏡觀察,鋇灌腸觀察,處理段結(jié)腸行HE染色、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)和S-100蛋白免疫組織化學(xué)染色觀察。 結(jié)果：苯扎氯胺作用后,大體解剖見對(duì)照組無(wú)異常,BAC組處理段結(jié)腸狹窄梗阻,近段結(jié)腸大量糞便堆積,呈不同程度的擴(kuò)張。組織學(xué)檢查見對(duì)照組結(jié)腸壁腸肌層排列有序,粘膜層及粘膜下層腸神經(jīng)竹存在。BAC組粘膜及粘膜下層無(wú)明顯病理性改變,平滑肌層增厚,肌間神經(jīng)元數(shù)目明顯減少。NSCs移植后可檢測(cè)到腸壁內(nèi)移植細(xì)胞存活,部分分化為神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。HE檢測(cè)和免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示,模型組手術(shù)段腸壁內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)明顯高于對(duì)照組(注射范圍內(nèi)均可見神經(jīng)細(xì)胞)。鋇灌腸結(jié)果顯示,神經(jīng)干細(xì)胞移植術(shù)前后結(jié)腸形態(tài)功能有明顯不同。 結(jié)論：運(yùn)用濃度0.5%苯扎氯按成功選擇性去除了大鼠結(jié)腸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,構(gòu)建成與無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥具有相似病理特征的大鼠巨結(jié)腸模型,為下一步的神經(jīng)干細(xì)胞移植治療先天性巨結(jié)腸癥奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的NSCs在無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的腸壁內(nèi)可以存活和分化,并能在一定程度上恢復(fù)腸神經(jīng)功能,從而為NSCs移植治療腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥 動(dòng)物模型 神經(jīng)干細(xì)胞 移植 功能改善
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R726.1;R-332
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 縮略語(yǔ)/符號(hào)說明8-9
• 前言9-13
• 研究現(xiàn)狀、成果9-12
• 研究目的、方法12-13
• 一、大鼠腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥動(dòng)物模型的建立13-22
• 1.1 對(duì)象和方法13-17
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料13
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及器械13-14
• 1.1.3 溶液配制14-17
• 1.2 結(jié)果17-20
• 1.2.1 癥狀及大體形態(tài)學(xué)觀察17-18
• 1.2.2 組織學(xué)檢查18-20
• 1.3 討論20-21
• 1.4 小結(jié)21-22
• 二、神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及移植22-36
• 2.1 對(duì)象和方法23-26
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物23
• 2.1.2 主要儀器設(shè)備和試劑23
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法23-26
• 2.2 結(jié)果26-32
• 2.3 討論32-35
• 2.4 小結(jié)35-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 發(fā)表論文及參加科研情況41-42
• 綜述一42-48
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 綜述二48-54
• 參考文獻(xiàn)51-54
• 致謝54

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐紀(jì)榮;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性巨結(jié)腸的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

，

本文編號(hào)：610170