埃及伊蚊galectin12基因的克
發(fā)布時(shí)間:2017-07-31 17:06
本文關(guān)鍵詞:埃及伊蚊galectin12基因的克隆、表達(dá)及殺蟲活性測(cè)定
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【摘要】:凝集素屬于β-半乳糖苷結(jié)合蛋白家族,廣泛存在于昆蟲的體內(nèi),對(duì)其免疫調(diào)控起重要作用,研究埃及伊蚊(Aedes aegypti)中的凝集素具有重要理論意義。本研究以埃及伊蚊凝集素galectin12基因序列設(shè)計(jì)引物,通過q RT-PCR擴(kuò)增獲得埃及伊蚊凝集素galectin12基因片段,將其連接到p MD-18T克隆載體,篩選陽性克隆子進(jìn)行酶切以及測(cè)序驗(yàn)證,根據(jù)酶切位點(diǎn)將目的基因片段連接到p ET-32a載體進(jìn)行原核表達(dá),獲得23 k D的目的蛋白,并采用His酶親和層析技術(shù)對(duì)目的蛋白進(jìn)行純化,獲得純化蛋白,并進(jìn)行生物活性測(cè)定,結(jié)果表明,Galectin12能夠抑制Bt對(duì)蚊蟲的毒力。研究結(jié)果為進(jìn)一步驗(yàn)證凝集素參與埃及伊蚊抵御Bt Cry毒素過程的機(jī)理奠定分子基礎(chǔ)。
【作者單位】: 福建農(nóng)林大學(xué)教育部生物農(nóng)藥與化學(xué)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 埃及伊蚊 克隆 表達(dá) galectin
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.31301724) 福建省新世紀(jì)人才支持計(jì)劃(No.k80MKT03a)
【分類號(hào)】:R384.1
【正文快照】: 埃及伊蚊(Aedes aegypti)屬雙翅目蚊蟲,是登革熱和黃熱病等蚊媒病傳播的重要媒介(謝暉等,2011)。長期以來,對(duì)蚊媒病的防治主要使用化學(xué)殺蟲劑。然而,化學(xué)殺蟲劑的使用不僅會(huì)使蚊蟲的抗藥性增強(qiáng),同時(shí)也帶來生態(tài)環(huán)境的破壞,危害人體健康等一些缺點(diǎn)。因此,發(fā)展新型無公害、無污染,
本文編號(hào):600180
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