本文關鍵詞：幽門螺桿菌侵入胃粘膜上皮細胞對細胞功能的影響及其機制

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【摘要】：目的：長期以來幽門螺桿菌（Helicobacter pylori, Hp)被認為是一種胞外菌，近年有研究發(fā)現，Hp可侵入胃上皮細胞，并可在細胞內繁殖存活，本課題旨在通過研究侵入胞內的Hp對胃上皮細胞功能的影響，探討Hp侵入胞內的致病作用及其機制。 方法：從本實驗室保存的Hp菌株中選擇2株高侵襲力菌株（標準株NCTC11637及臨床株T494）和2株低侵襲力菌株（標準株SS1及臨床株T049），分別感染人胃腺癌上皮細胞（AGS細胞）(MOI=100)，以抗β1整合素抗體預處理阻止侵襲為對照組，經慶大霉素保護性侵襲實驗，采用以下方法檢測侵入胞內Hp對細胞功能的影響：①CCK8法檢測細胞的增殖；②流式細胞儀檢測細胞凋亡；③ELISA檢測白細胞介素因子8（interleukin-8，IL-8）的表達；④細胞免疫熒光檢測活化誘導胞嘧啶核苷脫氨酶（activation-induced cytidine deaminase,AID）蛋白的表達；⑤實時定量反轉錄聚合酶鏈式反應（Real Time-PCR）分析AID的轉錄水平；⑥螢火蟲熒光素酶評價核轉錄因子NF-κB活性。用SN-50預處理AGS細胞以抑制NF-κB活性，重復上述①-⑤的檢測實驗。 結果：1、侵入胞內的Hp⑴促進AGS細胞的增殖，高侵株NCTC11637、T494作用的細胞增殖率（37.72%和36.51%）均高于低侵株SS1、T049（26.97%和26.17%），抗β1整合素抗體處理后各組AGS細胞的增殖率均降低（p0.05）；⑵不影響AGS細胞的凋亡，高侵株NCTC11637、T494凋亡率（2.79%和2.51%）和低侵株SS1、T049凋亡率（2.70%和2.44%）均與control組的2.62%相當；⑶誘導IL-8的表達，高侵株NCTC11637、T494誘導的IL-8濃度（9.94pg/ml和9.10pg/ml）均高于低侵株SS1、T049（6.31pg/ml和6.30pg/ml），抗β1整合素抗體處理后各組IL-8的濃度均下降（p0.05）；⑷刺激AGS細胞表達AID蛋白，AID蛋白定位于胞漿。高侵株NCTC11637、T494誘導的AID平均熒光強度值（14.48和13.48）均高于低侵株SS1、T049（11.07和9.96），高侵株NCTC11637、T494誘導的AID基因的mRNA相對表達量（1.57和1.55）均高于低侵株SS1、T049（1.35和1.23）；抗β1整合素抗體處理后各組AID蛋白和mRNA的表達均減少（p0.05）；⑸激活NF-κB通路，，高侵株NCTC11637、T494的相對熒光素酶活性值（1.57和1.55）均高于低侵株SS1、T049（1.35和1.23），抗β1整合素抗體處理后各組NF-κB的相對熒光素酶活性值均降低；⑹NF-κB抑制劑SN-50處理后各組AGS細胞增殖率降低， IL-8、AID蛋白和mRNA表達水平均降低。 結論：⑴侵入胞內的Hp可促進AGS細胞增殖但不影響細胞凋亡，可誘導IL-8和AID的異常表達；⑵侵入胞內的Hp可通過激活NF-κB通路參與致病過程；⑶高侵株對AGS細胞功能的影響較低侵株強，侵入胞內的Hp的致病作用可能與Hp的侵襲水平有關。
【關鍵詞】：幽門螺桿菌 侵襲 增殖 凋亡 IL-8 AID NF-κB
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R378
【目錄】：

• 英文縮略語4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 引言9-11
• 材料與方法11-24
• 結果24-36
• 討論36-39
• 結論39-40
• References40-42
• 綜述42-46
• 參考文獻44-46
• 致謝46

【共引文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 劉棟;翟笑楓;;幽門螺旋桿菌與肝癌相關性的研究進展[J];現代腫瘤醫(yī)學;2011年05期

2 張杰;佘菲菲;;幽門螺桿菌侵襲研究進展[J];中外醫(yī)學研究;2012年07期

中國碩士學位論文全文數據庫 前1條

1 吳中平;唾液幽門螺桿菌抗原測試板的臨床應用研究[D];浙江大學;2011年

本文編號：594077