本文關(guān)鍵詞：結(jié)核分枝桿菌毒素蛋白higB的原核表達(dá)及分析

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【摘要】：目的克隆編碼結(jié)核分枝桿菌毒素基因higB并在大腸桿菌中表達(dá)。方法利用PCR法從結(jié)核分枝桿菌H37Rv基因組擴(kuò)增higB基因;構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-higB;篩選出陽(yáng)性重組質(zhì)粒后轉(zhuǎn)化大腸桿菌,誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá);利用SDS-PAGE與Western-blot鑒定目的蛋白的表達(dá)。結(jié)果成功擴(kuò)增出了higB基因,克隆于載體pET-32a(+)質(zhì)粒中,PCR篩選和酶切鑒定獲得陽(yáng)性克隆,測(cè)序證實(shí)正確;轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21后higB蛋白沒(méi)有發(fā)生表達(dá)。結(jié)論已成功構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌毒素基因higB的原核表達(dá)栽體,但大腸桿菌BL21不能表達(dá)出higB蛋白。
【作者單位】： 濰坊醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教研室;濰坊醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;濰坊醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;菏澤市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;中國(guó)人民解放軍第401醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 毒素抗毒素系統(tǒng) higB 蛋白表達(dá)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金聯(lián)合資助(課題編號(hào):30972639,課題編號(hào):81170080)
【分類號(hào)】：R378.911
【正文快照】： 毒素抗毒素系統(tǒng)(toxin-antitoxin system,TAS)最早 物科技有限公司。發(fā)現(xiàn)于大腸桿菌的質(zhì)粒,隨后的研究表明,細(xì)菌染色體 1.1.2主要試劑及儀器質(zhì)粒抽提試劑盒、膠回收試上普遍存在著大量的TAS。大部分TAS由一對(duì)共表劑盒、PrimeSTAR HS DNA Polymerase、GC Buffer、達(dá)基因組成,編，

本文編號(hào)：585891