本文關鍵詞：驅動蛋白Kif18A多克隆抗體的制備、純化及免疫特異性檢測

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【摘要】：采用標簽蛋白誘導表達純化、蛋白質譜、Western Blot、免疫熒光染色等多種分子生物學與細胞生物學方法,探究了一種制備蛋白特異性多克隆抗體、檢測抗體并且運用抗體獲得蛋白翻譯后修飾信息的實驗思路.結果表明,使用這種方法可以高效地得到Kif18A的兔源多克隆抗體.得到的抗體血清可以很好地應用于Western Blot(蛋白免疫印跡)、Co-IP(免疫共沉淀)等分子生物學實驗.將抗體血清純化后可以應用于免疫熒光染色實驗,并可以獲得良好清晰的實驗結果.此外,利用制備出的Kif18A特異性抗體對細胞內源性Kif18A進行Co-IP實驗后進行質譜分析,得到了內源性Kif18A蛋白翻譯后的修飾信息,為研究Kif18A蛋白的定位與功能奠定了良好的基礎.
【作者單位】： 天津師范大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 驅動蛋白KifA 多克隆抗體 蛋白質譜 蛋白磷酸化
【基金】：國家自然科學基金面上項目(31271485);國家自然科學基金青年基金資助項目(31301138) 2011年教育部“新世紀優(yōu)秀人才支持計劃”資助項目(NCET-11-1066) 天津市應用基礎與前沿技術研究計劃重點項目(12JC2DJC21400)
【分類號】：Q51;R392
【正文快照】： 在已知的40余種驅動蛋白(kinesin)分子中,Kif18A蛋白近年來受到了越來越多的關注.在先前的文獻中報道,Kif18A蛋白分子在體外實驗中證實具有微管解聚活性.這不同于早期報道中典型的驅動蛋白分子的特性.先前認為驅動蛋白家族分子中有些具有微管解聚酶功能(如Kif2C,即MCAK蛋白),

【相似文獻】

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3 岳e，

本文編號：568631