本文關(guān)鍵詞：適合人肌母細胞的無血清培養(yǎng)基

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【摘要】：背景:肌母細胞體外培養(yǎng)大多使用添加胎牛血清培養(yǎng)基,存在很多不足,開發(fā)無血清培養(yǎng)基,更加穩(wěn)定、安全、經(jīng)濟,有廣泛的應(yīng)用前景。目的:初步探索適合人肌母細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基。方法:配制含胎牛血清培養(yǎng)基(DMEM/F12 1∶1添加胰島素樣生長因子1、堿性成纖維細胞生長因子和體積分數(shù)20%胎牛血清),間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基組(無血清培養(yǎng)基、2%血清替代物、2 mmol/L L-谷氨酰胺,人臍帶間充質(zhì)干細胞,細胞純度大于99%,UltraC ULTURETM添加血清替代物,谷氨酰胺)。自制無血清培養(yǎng)基組(GibcoTM添加胰島素樣生長因子1,堿性成纖維細胞生長因子,谷氨酰胺)。3種培養(yǎng)基分別對人肌母細胞分別進行培養(yǎng),觀察肌母細胞的形態(tài)、免疫組織化學(xué)的鑒定,計算克隆的形成率,繪制細胞生長的曲線,MTT檢測肌母細胞的活性,比較3種培養(yǎng)基培養(yǎng)肌母細胞增殖、分化的差異。結(jié)果與結(jié)論:各組細胞形態(tài)上無明顯差異;各組免疫組織化學(xué)鑒定肌母細胞純度均達99%;含胎牛血清培養(yǎng)基組和自制無血清培養(yǎng)基組克隆形成率顯著高于間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基組(P0.01),含胎牛血清培養(yǎng)基組克隆形成率顯著高于自制無血清培養(yǎng)基組(P0.01);含胎牛血清培養(yǎng)基組與自制無血清培養(yǎng)基組細胞數(shù)遠高于間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基組;自制無血清培養(yǎng)基組細胞活性顯著高于含胎牛血清培養(yǎng)基組和間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基組(P0.01)。自制無血清培養(yǎng)基組可有效用于肌母細胞的培養(yǎng),在促進肌母細胞早期貼壁、增殖上還需進一步優(yōu)化。
【作者單位】： 武警總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實驗中心;災(zāi)害救援醫(yī)學(xué)北京市重點實驗室;遼寧醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 肌纖維母細胞 幼牛血清 培養(yǎng)基 組織構(gòu)建 組織工程 肌母細胞 胎牛血清 無血清 血清替代物 谷氨酰胺 增殖 細胞培養(yǎng)
【分類號】：R329.2;Q813
【正文快照】： 0引言Introduction實驗細胞:采集成年燒傷志愿者股直肌手術(shù)后2 h內(nèi)的肌母細胞是已分化的最原始的肌性細胞,能夠彼此天肌肉組織2 g,剪碎組織塊除去脂肪后用膠原酶,胰酶消化,然融合和核傳遞,產(chǎn)生收縮蛋白,適用于細胞治療和基因過濾收集肌母細胞,接種到T25培養(yǎng)瓶,于37℃,體積分組

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