本文關(guān)鍵詞：VCAM-1基因敲減對小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)能力的影響

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【摘要】：目的:利用siRNA技術(shù)建立穩(wěn)定低表達(dá)血管間粘附分子1(VCAM-1)基因的小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞系(C3H10T1/2)并探討其對小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)能力的影響。方法:利用基因重組技術(shù)構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒GV118-VCAM-1-RNAi,應(yīng)用酶切及測序方法進(jìn)行相關(guān)鑒定,轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞系T293,收集病毒上清并感染C3H10T1/2細(xì)胞(C3),應(yīng)用熒光倒置顯微鏡及流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率,淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(LTT)和混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)檢測其免疫調(diào)節(jié)能力。結(jié)果:酶切和測序鑒定表明,成功構(gòu)建了低表達(dá)VCAM-1的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體GV118-VCAM-1-RNAi,感染C3H10T1/2細(xì)胞后,應(yīng)用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)分選獲得穩(wěn)定低表達(dá)VCAM-1的間充質(zhì)干細(xì)胞GV118-VCAM-1/C3;LTT和M LR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,低表達(dá)VCAM-1基因的M SC抑制T淋巴細(xì)胞增殖的能力顯著下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:敲減VCAM-1可顯著下調(diào)MSC抑制T淋巴細(xì)胞增殖的能力。這為進(jìn)一步研究VCAM-1基因與MSC免疫抑制功能的相關(guān)性提供了可靠的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院兒科;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞生物學(xué)研究室;河北北方學(xué)院研究生部;
【關(guān)鍵詞】： 血管細(xì)胞粘附分子 小RNA干擾 基因轉(zhuǎn)染 間充質(zhì)干細(xì)胞 免疫調(diào)節(jié)
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究計(jì)劃(973項(xiàng)目2010CB833600) 國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31070996,31171084) 天津市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(12JCYBJC17100)
【分類號】：R392
【正文快照】： △共同第一作者:倪永青,劉元林為共同第一作者.J Exp Hematol 2015;(3):796-801血管細(xì)胞粘附分子-1(vascular cell adhesionmolecule-1,VCAM-1),又稱CD106,屬于細(xì)胞粘附分子免疫球蛋白超家族(SIGF)成員,主要位于血管內(nèi)皮細(xì)胞及各種白細(xì)胞的表面,是一類具有多種生物學(xué)活性的跨

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6 那仁格日勒;溶血磷脂酸抑制人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞凋亡及其分子機(jī)理[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2013年

7 王黎明;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分泌蛋白表達(dá)譜研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

8 唐秋靈;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向男性生殖細(xì)胞分化的研究[D];汕頭大學(xué);2008年

9 徐小霞;人胎盤絨毛層間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的優(yōu)化及生物學(xué)特性的初步分析[D];蘇州大學(xué);2009年

10 王建軍;成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外長期培養(yǎng)及成骨潛能的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2009年

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本文編號：545470