本文關(guān)鍵詞：軟基質(zhì)力學(xué)特性對(duì)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的干預(yù)作用

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【摘要】：背景:課題組前期研究表明,較軟的培養(yǎng)基質(zhì)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)及細(xì)胞骨架有明顯的影響。目的:探討不同彈性模量的聚丙烯酰胺凝膠軟基質(zhì)對(duì)人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響。方法:無(wú)菌條件下獲取骨關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織,有限稀釋法獲得原代人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)記物鑒定,多向誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行功能鑒定。用丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺制備0.4,6,30 kPa3個(gè)彈性模量的聚丙烯酰胺凝膠軟基質(zhì)作為培養(yǎng)人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞的基底,在轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1存在的情況下分別培養(yǎng)7 d和14 d,RT-PCR方法檢測(cè)軟骨形成相關(guān)基因COL2A1、CRTAC1 mRNA的表達(dá),以6孔細(xì)胞培養(yǎng)板作為對(duì)照組。結(jié)果與結(jié)論:在不同彈性模量上生長(zhǎng)的人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞表現(xiàn)出不同的細(xì)胞形態(tài);軟基質(zhì)的彈性模量及培養(yǎng)時(shí)間對(duì)人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨基因COL2A1、CRTAC1的表達(dá)有交互作用:7 d時(shí),CRTAC1 mRNA在6 k Pa彈性模量聚丙烯酰胺凝膠上表達(dá)量最高(F=44.350,P=0.000);7 d時(shí),COL2A1 mRNA在0.4 k Pa彈性模量聚丙烯酰胺軟基質(zhì)上的表達(dá)量最高(F=6.384,P=0.005)。較低彈性模量的聚丙烯酰胺凝膠軟基質(zhì)比常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)板更具有促進(jìn)滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的作用。
【作者單位】： 天津市天津醫(yī)院骨科研究所;東莞啟智學(xué)校;
【關(guān)鍵詞】： 滑膜 間質(zhì)干細(xì)胞 丙烯酰胺類(lèi) 彈性模量 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 軟骨細(xì)胞 細(xì)胞分化 組織工程 干細(xì)胞 分化 軟基質(zhì) 聚丙烯酰胺凝膠軟基質(zhì) 滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞 單細(xì)胞克隆
【基金】：天津市衛(wèi)生局科技基金面上項(xiàng)目(2012KY23,2012KY25)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有良好的多向分化潛能,尤其具備優(yōu)越的成骨、成軟骨與成韌帶等分化潛能,是軟骨組織工程的一個(gè)重要的種子細(xì)胞來(lái)源[1-2]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),人滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞與膠原凝膠復(fù)合物進(jìn)行球狀培養(yǎng)[3]、雞尾酒法混合生長(zhǎng)因子可促進(jìn)人滑膜間充質(zhì)干

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