本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體呼吸道感染誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)機(jī)制的研究

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【摘要】：目的： 用沙眼衣原體小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm)呼吸道吸入感染小鼠誘導(dǎo)小鼠衣原體肺炎。在感染后的不同時(shí)期,檢測(cè)中性粒細(xì)胞(polymorphonuclear neutrophils, PMN)的免疫應(yīng)答水平、PMN聚集與細(xì)胞因子IL-17分泌的相關(guān)性,以及與PMN聚集相關(guān)的細(xì)胞因子、趨化因子、粘附分子及Toll樣受體的表達(dá)水平,探討在小鼠Cm呼吸道感染中PMN浸潤(rùn)機(jī)制。 方法： C57BL/6(C57)小鼠經(jīng)鼻腔吸入3×103IFU Cm,建立小鼠沙眼衣原體肺炎模型。取感染不同時(shí)間點(diǎn)小鼠肺組織進(jìn)行組織病理學(xué)染色、分離肺組織單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行PMN計(jì)數(shù)以及肺組織髓過氧化物酶(myelo-peroxidase, MPO)檢測(cè),確定感染小鼠肺組織有中性粒細(xì)胞聚集；用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)聚集的PMN活性變化。應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Cm感染誘導(dǎo)肺組織IL-17mRNA的表達(dá),利用ELISA技術(shù)檢測(cè)肺組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-17的分泌,應(yīng)用抗鼠IL-17單克隆抗體中和Cm感染小鼠內(nèi)源性IL-17,計(jì)數(shù)其支氣管肺泡灌洗液中的PMN數(shù)量,分析確定在小鼠Cm呼吸道感染過程中PMN浸潤(rùn)與有IL-17產(chǎn)生的相關(guān)性；利用RT-PCR技術(shù),檢測(cè)Cm感染小鼠肺組織與PMN浸潤(rùn)相關(guān)的活性分子mRNA的表達(dá)水平,包括：粘附分子ICAM-1、選擇素E-selectin、P-selectin、L-selectin, Toll樣受體TLR2、TLR4及MyD88,前炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α及趨化因子MIP-2、LIX、KC、MCP-1。 結(jié)果： Cm呼吸道感染誘導(dǎo)C57小鼠衣原體肺炎,小鼠體重下降,肺組織大量衣原體生長(zhǎng)(IFU增高)。與未感染對(duì)照組(第0天)比較,Cm感染誘導(dǎo)大量PMN在肺組織募集,PMN數(shù)量、百分率及活性明顯增高,髓過氧化物酶MPO的含量也顯著增高,炎癥并于感染后第7天達(dá)到最高峰。Cm呼吸道感染誘導(dǎo)IL-17在肺組織的表達(dá)及分泌。與給予抗鼠IL-17同型抗體IgG2a的對(duì)照組比較,IL-17中和小鼠肺組織PMN的浸潤(rùn)水平顯著降低,肺泡支氣管灌洗液PMN的數(shù)量減少,相關(guān)性分析結(jié)果顯示Cm呼吸道感染中肺組織IL-17的分泌水平與PMN的浸潤(rùn)呈正相關(guān)。同時(shí),Cm呼吸道感染的C57小鼠,肺組織中與PMN浸潤(rùn)相關(guān)的活性分子：粘附分子ICAM-1、選擇素E-selectin、P-selectin、L-selectin,Toll樣受體TLR2、TLR4及MyD88,前炎性細(xì)胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α及趨化因子MIP-2、LIX、KC、MCP-1的表達(dá)水平也顯著。 結(jié)論： 一定劑量的沙眼衣原體呼吸道感染誘導(dǎo)小鼠衣原體肺炎,小鼠肺組織大量PMN浸潤(rùn),活性增高,PMN的聚集與感染后大量產(chǎn)生的IL-17呈正性相關(guān),感染后高表達(dá)的前炎性細(xì)胞因子、PMN趨化性細(xì)胞因子、粘附分子、選擇素、Toll樣受體等在PMN趨化及浸潤(rùn)中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：沙眼衣原體 中性粒細(xì)胞 粘附分子 Toll樣受體 趨化因子選擇素 前炎性細(xì)胞因子 IL-17
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 符號(hào)說明10-12
• 前言12-16
• 研究現(xiàn)狀、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、中性粒細(xì)胞在小鼠衣原體呼吸道感染中的應(yīng)答水平及與IL-17的關(guān)系16-39
• 1.1 對(duì)象和方法16-24
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料16-19
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)方法19-24
• 1.2 結(jié)果24-35
• 1.2.1 小鼠衣原體呼吸道感染模型的建立24-26
• 1.2.2 Cm呼吸道感染小鼠肺組織中性粒細(xì)胞應(yīng)答水平26-30
• 1.2.3 Cm呼吸道感染小鼠肺組織IL-17的產(chǎn)生30-31
• 1.2.4 Cm呼吸道感染小鼠肺組織PMN的浸潤(rùn)水平與IL-17分泌的相關(guān)性31-35
• 1.3 討論35-38
• 1.4 小結(jié)38-39
• 二、Cm呼吸道感染中與中性粒細(xì)胞聚集相關(guān)的活性分子表達(dá)39-55
• 2.1 對(duì)象和方法39-45
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料39
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法39-45
• 2.2 結(jié)果45-50
• 2.2.1 Cm呼吸道感染誘導(dǎo)前炎癥細(xì)胞因子在肺組織中的表達(dá)45-46
• 2.2.2 Cm呼吸道感染誘導(dǎo)小鼠肺組織中性粒細(xì)胞趨化因子的表達(dá)46-47
• 2.2.3 Cm呼吸道感染誘導(dǎo)小鼠肺組織粘附分子與選擇素的表達(dá)47-48
• 2.2.4 Cm呼吸道感染誘導(dǎo)小鼠肺組織Toll樣受體的表達(dá)48-50
• 2.3 討論50-54
• 2.4 小結(jié)54-55
• 結(jié)論55-56
• 參考文獻(xiàn)56-62
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明62-63
• 綜述63-74
• 參考文獻(xiàn)68-74
• 致謝74

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：524358