本文關(guān)鍵詞：貼壁法和密度梯度離心法分離經(jīng)血源性子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞的比較研究

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【摘要】：目的:比較貼壁法和密度梯度離心法對經(jīng)血源性子宮內(nèi)膜間充質(zhì)干細(xì)胞(MB-MSCs)的分離效果。方法:選擇25~35歲月經(jīng)周期正常的健康女性的月經(jīng)血,分別采用貼壁法和密度梯度離心法分離MB-MSCs并進(jìn)行傳代。鏡下觀察原代細(xì)胞形態(tài)變化;對比原代及第2、3代細(xì)胞傳代時間;流式細(xì)胞儀檢測表面標(biāo)志物;阿爾辛蘭染色檢測其成軟骨能力。結(jié)果:貼壁法分離的原代細(xì)胞呈聚集樣生長,密度梯度離心法分離的原代細(xì)胞6 d后也呈聚集樣生長。貼壁法分離原代細(xì)胞的傳代時間(14.58±1.31)d明顯快于密度梯度離心法(19.17±1.34)d,差異有顯著意義(P0.05);第2、3代細(xì)胞的傳代時間兩種分離方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測,兩種方法分離的MB-MSCs陽性表面標(biāo)志物CD44、CD29、CD105、CD73含量和陰性表面標(biāo)志物CD31、CD45含量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),兩種方法分離的第3代細(xì)胞經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)后比較無顯著差別。結(jié)論:采用貼壁法與密度梯度離心法分離MB-MSCs效果相似,但貼壁法更適用于早期快速獲得純度較高的細(xì)胞。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科;武警后勤學(xué)院病原生物與免疫學(xué)教研室;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所實驗血液學(xué)國家重點實驗室干細(xì)胞醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 間充質(zhì)干細(xì)胞 子宮內(nèi)膜 經(jīng)血 貼壁法 密度梯度離心法
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81303108)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 目前,干細(xì)胞在組織工程、細(xì)胞工程領(lǐng)域潛在應(yīng)用價值越來越受到人們重視,迄今,已從成年人的骨髓、胚胎、臍血、外周血[1-4]等中發(fā)現(xiàn)了間充質(zhì)干細(xì)胞。2007年,Meng等[5]從健康女性的月經(jīng)血中分離出干細(xì)胞,這是一種新型的干細(xì)胞稱為經(jīng)血源性間充質(zhì)干細(xì)胞(menstrual blood mesenchy

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1 徐忠華;吳清玉;;貼壁法分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2007年05期

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1 馬洪梅;張曉梅;馮卓蕾;付小波;林英;李偉軍;;組織塊貼壁法培養(yǎng)兔的視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

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本文編號：523058