本文關(guān)鍵詞：基于微RNA的納米藥物抗三陰性乳腺癌的活性及機理研究

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【摘要】：乳腺癌的發(fā)病率在世界范圍內(nèi)居于女性惡性腫瘤的首位。其中三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是指雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及人類表皮生長因子受體（Her-2）的表達均為陰性的乳腺癌，約占乳腺癌的15%~20%。由于受體缺失，針對乳腺癌的特異性受體靶向治療方法無法應用于TNBC。較其它類型的乳腺癌TNBC具有易復發(fā)、易轉(zhuǎn)移和預后差等特點。因此，，研發(fā)新的治療手段成為了TNBC研究領域的難點和熱點。 MicroRNA(miRNA)作為一種單鏈非編碼的小RNA通過與靶mRNA的3'-UTR堿基互補結(jié)合，促進靶mRNA的降解或抑制其翻譯。近年來研究揭示miRNA與腫瘤的發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)。在調(diào)控癌基因和抑癌基因的表達中可發(fā)揮關(guān)鍵作用，參與調(diào)節(jié)腫瘤的生長、凋亡、侵襲、遷移和耐藥性等。其中，MicroRNA-34a(miR-34a)是一個Qg源性的在乳腺癌中具有較強抑癌活性的miRNA。 當前，基于小RNA的干擾藥物成為了新藥研發(fā)的熱點方向。但由于小核酸類藥物分子本身穿透細胞膜的能力極差，而且在生理環(huán)境中極不穩(wěn)定，沒有靶向性，因此基于miRNA的新型藥物研究的一個主要瓶頸是開發(fā)高效并具有良好生物相容性的輸送載體。在本研究中，我們構(gòu)建了一種可用于遞送miRNA的基于透明質(zhì)酸/硫酸魚精蛋白聚電解質(zhì)的納米復合物(HP-IPECs)載體。該納米復合物可以依靠電荷相互作用自組裝形成，并且能夠高效地包載miR-34a。 體內(nèi)外的實驗證明復合納米載體可以有效地遞送miR-34a到乳腺癌細胞和組織中。機理研究顯示復合物納米載體投遞的miR-34a通過靶向CD44和Notch-1等信號途徑誘導乳腺癌細胞的凋亡并抑制乳腺癌細胞的增殖、遷移和腫瘤生長。研究結(jié)果表明MHP-IPECs作為一種基于miRNA的生物可降解的納米藥物可以為三陰性乳腺癌的治療提供新的思路。
【關(guān)鍵詞】：聚電解質(zhì)復合物 三陰性乳腺癌 MiR-34a
【學位授予單位】：北京工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R373.9
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 英文縮寫詞7-11
• 第1章 緒論11-19
• 1.1 三陰性乳腺癌12
• 1.2 MiRNA 的生成12-13
• 1.3 MiRNA 與乳腺癌13-15
• 1.3.1 MiRNA 作為乳腺癌癌基因13-14
• 1.3.2 MiRNA 作為乳腺癌抑制基因14-15
• 1.4 納米藥物載體15-17
• 1.4.1 腫瘤的化學治療15-16
• 1.4.2 腫瘤的基因治療16
• 1.4.3 靶向納米藥物16-17
• 1.5 本課題的選題目的及主要研究內(nèi)容17-19
• 第2章 MHP-IPECs 納米藥物的制備及體外抗腫瘤效果評價19-39
• 2.1 實驗材料19-20
• 2.1.1 納米載體19
• 2.1.2 細胞株19
• 2.1.3 實驗試劑19-20
• 2.2 實驗儀器20-21
• 2.3 實驗方法21-28
• 2.3.1 HP-IPECs 和 MHP-IPECs 的制備21
• 2.3.2 HP-IPECs 的表征21
• 2.3.3 MHP-IPECs 血清穩(wěn)定性分析21
• 2.3.4 MHP-IPECs 釋放 miR-34a 的動力學21
• 2.3.5 細胞培養(yǎng)傳代21-22
• 2.3.6 HP-IPECs 細胞毒性評價22
• 2.3.7 細胞免疫熒光22-23
• 2.3.8 細胞內(nèi) MHP-IPECs 分布23
• 2.3.9 檢測轉(zhuǎn)染后細胞內(nèi) miR-34a 水平23-24
• 2.3.10 MHP-IPECs 對乳腺癌細胞增殖的影響24-25
• 2.3.11 MHP-IPECs 對乳腺癌細胞侵襲的影響25
• 2.3.12 MHP-IPECs 對乳腺癌細胞遷移的影響25
• 2.3.13 細胞劃痕實驗25-26
• 2.3.14 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率26
• 2.3.15 檢測細胞內(nèi) miR-34a 下游蛋白水平26-28
• 2.4 實驗結(jié)果28-36
• 2.4.1 HP-IPECs 的理化性質(zhì)28
• 2.4.2 MiR-34a 在血清中的穩(wěn)定性和釋放動力學評價28-30
• 2.4.3 HP-IPECs 的細胞毒性30-31
• 2.4.4 不同轉(zhuǎn)移能力的乳腺癌細胞中 CD44 表達量定性31
• 2.4.5 MHP-IPECs 將 FAM 標記的 miR-34a 輸送到腫瘤細胞31-32
• 2.4.6 MHP-IPECs 抑制乳腺癌細胞的增殖32-33
• 2.4.7 MHP-IPECs 降低乳腺癌細胞的侵襲與遷移能力33-34
• 2.4.8 MHP-IPECs 促進乳腺癌細胞的凋亡34-35
• 2.4.9 MHP-IPECs 抑制了 miR-34a 靶蛋白表達35-36
• 2.5 討論36
• 2.6 小結(jié)36-39
• 第3章 MHP-IPECs 體內(nèi)抗腫瘤效果評價39-49
• 3.1 實驗材料39-40
• 3.1.1 納米載體39
• 3.1.2 細胞株39
• 3.1.3 實驗動物39
• 3.1.4 實驗試劑39-40
• 3.2 實驗儀器40
• 3.3 實驗方法40-45
• 3.3.1 乳腺癌動物模型的建立40
• 3.3.2 動物分組與給藥40-41
• 3.3.3 檢測腫瘤組織內(nèi) miR-34a 水平41-42
• 3.3.4 檢測腫瘤組織內(nèi) miR-34a 靶蛋白水平42-43
• 3.3.5 蘇木素伊紅(HE)染色43-44
• 3.3.6 免疫組織化學染色44
• 3.3.7 TUNEL 染色檢測乳腺癌原位腫瘤細胞凋亡44-45
• 3.4 實驗結(jié)果45-47
• 3.4.1 裸鼠移植瘤生長曲線和瘤重觀察45
• 3.4.2 MHP-IPEC 抑制了腫瘤組織中 miR-34a 靶蛋白的表達45-46
• 3.4.3 免疫組織化學染色46-47
• 3.4.4 TUNEL 和 HE 染色47
• 3.5 討論47-48
• 3.6 小結(jié)48-49
• 結(jié)論49-51
• 參考文獻51-57
• 攻讀碩士學位期間所發(fā)表的學術(shù)論文57-59
• 致謝59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王夢迪;何廣衛(wèi);;靶向遞藥系統(tǒng)白蛋白納米粒的研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2013年10期

2 季秀峰;石莉;鄧意輝;;白蛋白納米粒藥物傳遞系統(tǒng)的研究進展[J];沈陽藥科大學學報;2010年12期

3 羅湘;史艷俠;李志銘;張東生;蘇爭艷;姜文奇;;三陰乳腺癌的臨床病理特征和預后分析[J];中國癌癥雜志;2009年07期

4 吳小虎;代文杰;;Met:有望成為治療三陰型乳腺癌的新靶點[J];中國普外基礎與臨床雜志;2013年07期

本文編號：521697