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SrtA大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)OPG及功能研究

發(fā)布時間:2017-07-02 20:11

  本文關(guān)鍵詞:SrtA大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)OPG及功能研究


  更多相關(guān)文章: OPG RANKL TRAIL 親和力 破骨細(xì)胞 細(xì)胞凋亡


【摘要】:骨保護(hù)素作為OPG/RANKL/RANK信號通路的重要分子之一,參與了骨重建、免疫功能發(fā)育、血管疾病發(fā)生和乳腺組織的發(fā)育等一系列生理學(xué)功能。目前重組OPG的主要表達(dá)方式為昆蟲桿狀病毒表達(dá)體系和哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)。迄今為止還沒有原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)OPG的研究報道。在本研究中,我們利用SrtA大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)成功獲得了具有生物學(xué)功能的OPG。該OPG具有RANKL和TRAIL的結(jié)合活性,表面等離子共振(SPR)技術(shù)測定表明其親和力分別為8.2nM和88.7nM。隨后的破骨細(xì)胞分化實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)證明該OPG具有抑制破骨細(xì)胞分化能力和抑制TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡能力。
【關(guān)鍵詞】:OPG RANKL TRAIL 親和力 破骨細(xì)胞 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:安徽大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R378.21
【目錄】:
  • 致謝4-5
  • 摘要5-6
  • Abstract6-10
  • 第一章 緒論10-22
  • 1. OPG/RANKL/RANK信號通路的發(fā)現(xiàn)10-15
  • 2. OPG/RANKL/RANK信號通路的調(diào)節(jié)15-17
  • 3. OPG/RANKL/RANK在生理學(xué)上作用17-19
  • 3.1 OPG/RANKL/RANK在骨發(fā)育中的作用17-18
  • 3.2 OPG/RANKL/RANK在血管發(fā)育中的作用18-19
  • 3.3 OPG/RANKL/RANK在免疫系統(tǒng)發(fā)育中的作用19
  • 4. OPG與TARIL的關(guān)系19-20
  • 5. OPG在臨床上應(yīng)用及本研究的意義20-22
  • 第二章 OPGT的表達(dá)及功能研究22-45
  • 1. 引言22-23
  • 2. 材料方法23-36
  • 2.1 質(zhì)粒、菌株和細(xì)胞23
  • 2.2 試劑、實(shí)驗(yàn)材料與儀器23-25
  • 2.3 常用溶液的配制25-28
  • 2.4 實(shí)驗(yàn)方法28-36
  • 3. 結(jié)果36-44
  • 3.1 利用pET-28a和pGEX-6p-1為載體表達(dá)結(jié)果36-38
  • 3.2 pET-28a-SrtA-LPETG-OPGT的構(gòu)建和表達(dá)38-39
  • 3.3 OPGT與hTRAIL和hRANKL親和力測定39-40
  • 3.4 OPGT能抑制破骨細(xì)胞分化40-42
  • 3.5 OPGT可以抑制TRAIL誘導(dǎo)的凋亡42-44
  • 4. 討論44-45
  • 結(jié)論45-46
  • 參考文獻(xiàn)46-52

【相似文獻(xiàn)】

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7 本報記者 鄭穎t牎∥飧,

本文編號:511029


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