大鼠原代小膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法的改進(jìn)
本文關(guān)鍵詞:大鼠原代小膠質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法的改進(jìn),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:探索改進(jìn)大鼠原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)分離純化方法,以獲取數(shù)量多、功能活性穩(wěn)定的小膠質(zhì)細(xì)胞。方法:在Miriam Mecha的混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上稍加改良,采用直立手搖法進(jìn)行分離純化小膠質(zhì)細(xì)胞,細(xì)胞鋪板后再采用差速貼壁法進(jìn)一步得到更純的小膠質(zhì)細(xì)胞。使用臺盼藍(lán)法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);采用CD11b免疫熒光方法對純化的小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行純度鑒定;采用原代小膠質(zhì)細(xì)胞吞碳粒實(shí)驗(yàn)對其功能活性進(jìn)行檢測。結(jié)果:改進(jìn)的方法可以穩(wěn)定地獲取大約1×106個/培養(yǎng)瓶(75 cm2,10 ml)的小膠質(zhì)細(xì)胞,純度達(dá)到98%,并且其吞噬活性也非常強(qiáng)。結(jié)論:改進(jìn)的原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法操作時間短,獲得細(xì)胞數(shù)量多、穩(wěn)定性好、純度高、功能活性強(qiáng),且可第二次收獲細(xì)胞,對于離體條件下進(jìn)行小膠質(zhì)細(xì)胞的研究具有廣泛的實(shí)用價(jià)值。
【作者單位】: 上海中醫(yī)藥大學(xué)生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 小膠質(zhì)細(xì)胞 培養(yǎng)方法 分離純化 鑒定 大鼠
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81274119) 上海市教育委員會科研創(chuàng)新項(xiàng)目(13YZ050) 上海市教育委員會重點(diǎn)學(xué)科資助項(xiàng)目(J50301)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 近年大量研究表明小膠質(zhì)細(xì)胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷和疾病中(如阿爾茨海默癥,帕金森病等)起著非常重要的作用[1-3]。小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia)作為腦內(nèi)固有免疫細(xì)胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最主要的一道免疫防線。一旦腦內(nèi)出現(xiàn)損傷、感染、神經(jīng)變性等過程均可刺激小膠質(zhì)細(xì)胞由靜息態(tài)轉(zhuǎn)化
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號:498278
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