本文關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒NS3蛋白的原核表達(dá)及多克隆抗體制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：提高對(duì)丙型肝炎患者實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的靈敏度和特異性,對(duì)相關(guān)人群進(jìn)行篩查和早期診斷,是控制丙型肝炎病毒(HCV)流行與傳播的有效措施。為了建立更為可靠的HCV診斷方法,通過(guò)采用PCR方法從J6/JFH12a型病毒中克隆出HCV ns3基因片段,將其連接到p ET-28a載體上,重組載體p ET-28a-ns3轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)后誘導(dǎo)表達(dá),以10%SDS-PAGE進(jìn)行鑒定,獲得表達(dá)的NS3重組蛋白分子量為72 k Da。將純化的NS3蛋白免疫BALB/c小鼠,第4次免疫后采集血液并分離血清進(jìn)行抗體活性鑒定,小鼠抗體效價(jià)為1∶256 000。進(jìn)一步的Western blotting和間接免疫熒光結(jié)果顯示,以重組NS3蛋白免疫小鼠制備的多克隆抗體可以很好地識(shí)別HCV感染Huh7.5.1細(xì)胞中的NS3蛋白,為下一步開展單克隆抗體制備和檢測(cè)試劑盒研制工作奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;云南省分子醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 丙型肝炎病毒 B細(xì)胞表位 NS蛋白 多克隆抗體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81260248) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No.2014BAI01B01) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃(No.KKS0201326002) 昆明理工大學(xué)人才培養(yǎng)基金(No.KKSY201326085) 云南省科技創(chuàng)新平臺(tái)建設(shè)計(jì)劃(No.2012DA002)資助~~
【分類號(hào)】：R373.21
【正文快照】： Received:September 13,2014;Accepted:December 10,2014Supported by:National Natural Science Foundation of China(No.81260248),National Science and Technology Surport Program ofChina(No.2014BAI01B01),Applied Basic Research Projects of Yunnan Province(No.KKS0

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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3 劉s

本文編號(hào)：482514