本文關(guān)鍵詞：LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化過程中Pim-1表達(dá)及調(diào)控通路的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化過程中,Pim-1的動態(tài)表達(dá)情況及抑制PI3K、P38MAPK、MEK1/2、JAK2信號關(guān)鍵分子對巨噬細(xì)胞中Pim-1表達(dá)的影響。 方法：分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,隨機(jī)分為7組,各組分別用1μg/ml脂多糖(LPS)處理Oh,1h,2h,4h,8h,12h,24h,利用q-RT PCR、Western blot技術(shù)檢測各組巨噬細(xì)胞中Pim-1mRNA及Pim-1蛋白的動態(tài)表達(dá)情況。分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,隨機(jī)分為6組,各組分別用LPS, DMSO+LPS, LY294002(P13K抑制劑)+LPS, SB203580(P38MAPK抑制劑)+LPS, AG490(MEK1/2抑制劑)+LPS,U0126(JAK2抑制劑)+LPS處理細(xì)胞,利用Western blot技術(shù)檢測各特異性信號分子抑制劑對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中Pim-1蛋白表達(dá)的影響。 結(jié)果：①LPS刺激能迅速上調(diào)巨噬細(xì)胞中Pim-1mRNA水平,LPS刺激1h后即可檢測到Pim-1mRNA表達(dá)增高,Pim-1mRNA高峰在LPS刺激2h出現(xiàn),約是對照組的6倍,LPS刺激12h后Pim-1mRNA即回落至基礎(chǔ)水平。②LPS刺激能迅速上調(diào)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中Pim-1蛋白的表達(dá),LPS刺激1h后即可檢測到Pim-1蛋白表達(dá)增高；Pim-1蛋白水平在LPS刺激1-8h后維持增高水平,LPS刺激12h后Pim-1蛋白水平即回落至基礎(chǔ)水平。③P13K抑制劑,P38MAPK抑制劑,MEK1/2抑制劑,JAK2抑制劑分別下調(diào)巨噬細(xì)胞中p-AKT, p-P38, p-ERK, p-JAK2的表達(dá),PI3K、P38MAPK、MEK1/2、JAK特異性抑制劑均能下調(diào)LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中Pim-1蛋白表達(dá)水平。 結(jié)論：①巨噬細(xì)胞中Pim-1mRNA及蛋白在LPS刺激后迅速表達(dá)上調(diào),體現(xiàn)Pim-1早期即刻基因的特性。Pim-1在巨噬細(xì)胞早期活化過程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。②PI3K/AKT、P38MAPK、MEK/ERK、 JAK2/STATs信號通路均參與調(diào)控巨噬細(xì)胞中Pim-1的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：Pim-1 巨噬細(xì)胞 炎癥反應(yīng) PI3K P38MAPK JAK NEK1/2
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R392
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 本文主要英漢~.略語名詞對照表11-13
• 前言13-15
• 第一章 LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化過程中Pim-1的表達(dá)15-31
• 1 材料與方法15-25
• 1.1 材料15-17
• 1.1.1 實驗動物15
• 1.1.2 主要試劑15-16
• 1.1.3 主要儀器設(shè)備16-17
• 1.2 實驗方法17-25
• 1.2.1 主要溶液的配制17-19
• 1.2.2 分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞及實驗分組19-20
• 1.2.3 Real time PCR檢測Pim-1 mRNA的表達(dá)20-22
• 1.2.4 Westernblot技術(shù)檢測Pim-1蛋白的表達(dá)22-25
• 1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析25
• 2 結(jié)果25-29
• 2.1 小鼠巨噬細(xì)胞培養(yǎng)情況25-26
• 2.2 LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化過程中Pim-1 mRNA的動態(tài)表達(dá)26-27
• 2.3 LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化過程中Pim-1蛋白的動態(tài)表達(dá)27-29
• 3 討論29-31
• 第二章 巨噬細(xì)胞中調(diào)控Pim-1表達(dá)的關(guān)鍵信號分子31-43
• 1. 材料與方法31-34
• 1.1 材料31-32
• 1.1.1 實驗動物31
• 1.1.2 主要試劑31-32
• 1.1.3 主要儀器設(shè)備32
• 1.2 實驗方法32-34
• 1.2.1 主要溶液的配制32-33
• 1.2.2 分離培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞及實驗分組33
• 1.2.3 Westernblot技術(shù)檢測p-AKT、p-P38、p-ERK、p-JAK2、Pim-1蛋白的表達(dá)33-34
• 1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法34
• 2 結(jié)果34-38
• 2.1 p-AKT、p-P38、p-ERK、p-JAK2蛋白表達(dá)情況34-37
• 2.2 特異性信號分子抑制劑對巨噬細(xì)胞中Pim-1蛋白表達(dá)的影響37-38
• 3 討論38-43
• 全文總結(jié)43-44
• References44-52
• 綜述52-66
• References60-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：472497