本文關(guān)鍵詞：RNA干擾血管緊張素原基因表達(dá)對(duì)前脂肪細(xì)胞3T3-L1分化的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:構(gòu)建靶向血管緊張素原(AGT)基因的RNA干擾質(zhì)粒,研究AGT基因?qū)κ笄爸?T3-L1分化的影響。方法:設(shè)計(jì)靶向AGT的小分子RNA干擾片段(AGT-shRNA),以未靶向任何DNA的小分子RNA(Non-shRNA)為對(duì)照,利用載體psiRNA-U6.1/Neo構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染鼠前脂肪細(xì)胞3T3-L1并篩選到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株,RT-PCR和SDS-PAGE法分別檢測AGT基因沉默效果,通過顯微鏡觀察和脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志物檢測來確定AGT基因干擾對(duì)3T3-L1細(xì)胞分化的影響。結(jié)果:成功構(gòu)建AGT干擾質(zhì)粒,與對(duì)照組比較,AGT基因轉(zhuǎn)錄水平受到顯著抑制(P0.05),AGT蛋白表達(dá)水平也僅為對(duì)照的43.86%。AGT基因干擾后3T3-L1細(xì)胞脂質(zhì)水平和甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)活性仍隨分化時(shí)間延長呈上升趨勢,但增長量明顯低于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:RNA干擾AGT基因可明顯抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化,提示脂肪組織中的腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)與脂肪代謝有重要關(guān)聯(lián)。
【作者單位】： 深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院應(yīng)用化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院;華南理工大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 血管緊張素原 RNA干擾 T-L 分化
【基金】：廣東省教育廳產(chǎn)學(xué)研結(jié)合項(xiàng)目資助課題(2012B091100408) 深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目資助課題(07KJba160) 廣東省深圳市創(chuàng)新委新興產(chǎn)業(yè)公共技術(shù)服務(wù)平臺(tái)項(xiàng)目資助課題(GGJS20130331152344401)
【分類號(hào)】：R33
【正文快照】： 腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensinsystem,RAS)是人體內(nèi)重要的體液調(diào)節(jié)系統(tǒng),對(duì)穩(wěn)定心血管系統(tǒng)功能、維持體液平衡和調(diào)節(jié)血壓有重要作用,與高血壓和糖尿病等疾病關(guān)系密切[1]。在RAS中,血管緊張素原(angiotensinogen,AGT)是產(chǎn)生具有生物活性血管緊張素的前體物質(zhì),其在腎素

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4 王玉t，

本文編號(hào)：471341