本文關(guān)鍵詞：二階段模式化學(xué)誘發(fā)小鼠肝癌模型的建立與優(yōu)化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討采用DEN大劑量激發(fā)為啟動(dòng)劑,CCl4、乙醇、乙硫氨酸作為促癌劑,聯(lián)合配伍為不同誘導(dǎo)方案建立二階段模式的BALB/c小鼠肝癌模型,并試圖找到一個(gè)最佳的優(yōu)化造模方案。 方法：230只雄性BALB/c小鼠動(dòng)物隨機(jī)分為6組：DEN+CCl4組50只、DEN+CCl4+乙醇組50只、DEN+CCl4+乙硫氨酸組50只、DEN+乙硫氨酸組30只、DEN+乙硫氨酸+乙醇組30只和正常對(duì)照組20只。DEN+CCl4、 DEN+CCl4+乙醇、DEN+CCl4+乙硫氨酸三組小鼠首先按100mg/kg體重腹腔注射DEN兩次,第3周開始后,灌胃20%CCl4橄欖油溶液(0.1ml/10g,2次／周),第8周20%CCl4橄欖油溶液加量到0.12ml/10g；DEN+CCl4+乙醇組小鼠加予含10%乙醇飲水自由飲用；DEN+CCl4+乙硫氨酸組小鼠則灌胃DL-乙硫氨酸(150mg/kg,2次／周)。DEN+乙硫氨酸、DEN+乙硫氨酸+乙醇兩組小鼠首先按上述方法予DEN,第三周后均灌胃DL-乙硫氨酸(150mg/kg,2次／周),而DEN+乙硫氨酸+乙醇組同時(shí)供10%乙醇飲水自由飲用；誘癌藥物均持續(xù)給藥至18周。正常對(duì)照組僅給予正常的飼料及飲用滅菌普通水。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行20周。于第4、6、8、10、12、14、16、18周隨機(jī)處死各組小鼠3只,至20周全部處死,獲取相關(guān)組織常規(guī)制作病理切片觀察肝癌發(fā)生情況和RT-PCR檢測(cè)誘癌20周后各組AFP基因的表達(dá)情況。 結(jié)果：在整個(gè)誘癌過(guò)程中,正常對(duì)照組小鼠生長(zhǎng)狀況良好,無(wú)自然死亡,肝臟未見(jiàn)異常。所有實(shí)驗(yàn)組小鼠與正常對(duì)照組小鼠一樣體重都有所增長(zhǎng),但在誘癌20周時(shí),DEN+CCl4+乙醇組小鼠體重和肝絕對(duì)重量均低于其他實(shí)驗(yàn)組(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組DEN+CCl4、DEN+CCl4+乙醇和DEN+CC14+乙硫氨酸三組小鼠均成功誘發(fā)肝癌,癌變過(guò)程大致經(jīng)歷了肝細(xì)胞損傷-修復(fù)期、增生-硬化期和肝細(xì)胞癌變等三個(gè)階段,與人肝癌的發(fā)生發(fā)展及病理學(xué)變化相似,其中以DEN+CC14+乙醇組肝臟病變最為明顯。DEN+CCl4組、DEN+CCl4+乙醇組、DEN+CCl4+乙硫氨酸組、DEN+乙硫氨酸組、DEN+乙硫氨酸+乙醇組、對(duì)照組成癌率分別為33.3%(7/21)、80%(16/20)、36.4%(8/22)、0%(0/16)、0%(0/16)和0%(0/8)。誘發(fā)的肝癌主要為肝細(xì)胞肝癌,以高中分化為主。DEN+CCl4組與DEN+CCl4+乙醇組肺轉(zhuǎn)移發(fā)生率分別為14.3%(1/7)、31.2%(5/16)。其他組并未發(fā)生肺轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。經(jīng)RT-PCR檢測(cè),在DEN+CCl4、DEN+CCl4+乙醇及DEN+CCl4+乙硫氨酸三組誘癌20周的肝癌組織中AFP基因表達(dá)與妊娠1周的胎肝組織一樣高表達(dá),在轉(zhuǎn)移的肺組織上也有少量AFP基因的表達(dá),而DEN+乙硫氨酸組、DEN+乙硫氨酸+乙醇和正常組肝組織中均未見(jiàn)AFP基因表達(dá)。 結(jié)論：采用DEN啟動(dòng),CCl4/乙醇連續(xù)促進(jìn)的方法誘導(dǎo)的二階段BALB/c小鼠肝癌模型操作簡(jiǎn)便,成瘤期短,癌變率高,與人類肝癌發(fā)生發(fā)展相似,是研究肝癌較為理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。
【關(guān)鍵詞】：肝腫瘤 動(dòng)物模型 小鼠 二乙基亞硝胺 四氯化碳 乙醇 乙硫氨酸
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R735.7;R-332
【目錄】：

• 英漢縮略一覽表4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-13
• 材料和方法13-23
• 結(jié)果23-36
• 討論36-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 綜述49-60
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 攻讀碩士學(xué)位期間文章發(fā)表情況60-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：二階段模式化學(xué)誘發(fā)小鼠肝癌模型的建立與優(yōu)化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：467038